PIG7与丙戊酸促进人白血病细胞SKNO-1的分化和凋亡.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(6)：1009．1013 [文章编号] 1000-4718(2013)06—1009-05 PIG7与丙戊酸促进人 白血病细胞 SKNO．1的分化和凋亡 邢海燕 ， 陈一瑞 ， 刘家卓 ， 唐克晶， 田 征，饶 青， 王 敏， 王建祥 (中国医学科学院，北京协和医学院血液学研究所，血液病医院，实验血液学国家重点实验室，天津300020) [摘 要】 目的：研究p53诱导基因7(PIG7)对人白血病细胞SKNO-1的作用及组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊 酸(VPA)的协同效应。方法：SKNO．1细胞经不同浓度的VPA(1～10reotol／L)分别作用后，用MTr法检测VPA对 SKNO．1细胞增殖的影响。通过病毒包装及感染系统分别将带有 PIG7开放读码框和反义寡核苷酸片段的慢病毒 载体导人 SKNO-1细胞 ，用RT．PCR及Westernblotting检测SKNO．1细胞中PIG7的mRNA及蛋白表达情况；用流式 细胞术检测VPA作用于病毒感染后SKNO-1细胞的凋亡率和分化抗原CD1lb的表达；DNAladder实验分析细胞 的凋亡。结果：VPA可明显抑制SKNO-1细胞增殖，且具有时间、剂量依赖性。过表达PIG7促进SKNO-1细胞的凋 亡和分化，联合VPA作用后细胞分化抗原CD1lb的表达水平和细胞凋亡率明显高于空载体组(P0．05)，并出现 典型的DNA梯状条带。结论 ：VPA具有抑制SKNO-1细胞增殖和诱导其分化及凋亡的作用。过表达PIG7可促进 SKNO-1细胞的凋亡和分化 ，并增加SKNO．1细胞对VPA的敏感性。过表达PIG7联合VPA有望成为白血病治疗的 新策略。 [关键词] p53诱导基因7；丙戊酸；组蛋白脱乙酰酶；白血病 ；细胞凋亡 [中图分类号] R733．7 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2013．06．OO9 PIG7and vaiproicacidpromotedifferentiation and apoptosisofhuman leukemiaSKNo．1cells XINGHai—yan，CHENYi—rui，LIUJia-zhuo，TANGKe-jing，TA【NZheng，RAOQing， WANGMin．WANGJian．xiang (StateKeyLaboratoryofExperimentalHematology，InstituteofHematologyBloodDiseaseHospital，ChineseAcademyof MedicalSciencesPekingUnionMedicalCollege，Tianjin300020，China．E-ma il：wangx@ihcams．口c．on) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethesynergisticeffectofp53-induciblegene7(PIG7)andhistonedeacetylase (HDAC)inhibitorvalproicacid(VPA)onthedifferentiationnadapoptosisofhumna leukemiaSKNO-1ceHs．METH- ODS：TheDNAfragmentscontainingPIG7openreadingframeorantisenseoligonueleotideswere subclonedintolentiviral vector．SKNO-1cellswere~ansducedwiht preparedlentivims．Transgeneexpressionwasdetectedbysemi—qunatitative RT-PCR nadWestern blotting．TheexpressionofmyeloidcelldffierentiationnatigenCD1lbnadtheapoptoticcellswere analyzedbyflow cytometry．DNA fragmentationanalysisw