miR-26a+mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析.pdfVIP

ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(2)：367—370、374 · 367 · — — [文章编号] 1000—4718(2011)02—0367—05 · 短篇论著 · miR一26amimics转染人肝癌细胞株 HepG2的 表达蛋 白质组分析 水 刘友平 ， 李 娟 ， 代荣阳 ， 段春燕 ， 陈绍坤 ， 严冬梅 ， 陈川宁 ， 李 洪 (泸州医学院 生物化学教研室，人类疾病细胞信号与调控四川省高校重点实验室， 医学生物学与遗传学教研室，四川 泸州 646000) [摘 要] 目的：通过分析microRNA一26a(miR一26a)mimics转染对人肝癌细胞株HepG2表达蛋白质组的影 响，以确定miR一26a与肝癌发生发展的相关性。方法：常规培养人肝癌细胞株HepG2，经miR。26amimics转染48h 后进行细胞周期分析，并裂解转染72h的HepG2细胞提取蛋白，双向电泳分离，匹配对比各蛋白斑点的表达量，筛选 主要差异表达蛋白进行质谱鉴定。结果：HepG2细胞经miR一26amimics转染后细胞增殖受到抑制；其蛋白2一DE 图谱与对照组比较，差异表达超过2倍的蛋白斑点有 11个。其中，有3个蛋白斑点为表达上调，有8个蛋白斑点为表 达下调。质谱鉴定为：膜联蛋白A1、过氧化物酶4、增殖细胞核抗原、载脂蛋白Al、细胞色素c氧化酶5a、细胞周期蛋 白E2、磷酸核糖焦磷酸激酶3、周期素依赖性蛋白激酶 1和磷脂酰乙醇胺结合蛋白。结论：miR一26a可能通过影响 上述蛋白分子的表达 ，直接或间接地调控HepG2肝癌细胞的增殖、分化和死亡，以发挥其抗癌作用。 [关键词] miR一26amimics；微小RNA；HepG2细胞；蛋白质组 [中图分类号] Q291 [文献标识码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．02—029 Analysisofexpressiveproteomein human hepatocarcinoma cellHepG2 transfectedwithm iR -26am im ics LIUYou—ping，M Juan ，DAIRong—yang ，DUANChun—yan ，CHENShao—kun ， YAN Dong—mel。，CHEN Chuan—ning ，LIHong (DepartmentofBiochemistry，KeyLaboratoryofSichuanCollegesandUniversitiesforCellSignaland RegulationinHu- manDsieases，DepartmentofMedicalBoilogyand Genetics，LuzhouMedcialColelge，Luzhou646000，China．E—mail： lihong7188@163．corn) [ABSTRACT] AIM ：TodeterminewhethermicroRNA一26a(miR一26a)isinvolvedindevelopmentofliver cancerbyanalysisofproteomicexpressionprofileofhumanhepatocarcinomacellHepG2transfectedwithmiR——26amim．． ics．METHODS：HepG2cellswereculturedbyarout