MLPA联合FISH在DMD基因突变产前诊断中的价值探讨.pdfVIP

ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(10)：1895一l9o0 · 1895 · [文章编号】 1000—4718(2010)10—1895—06 MLPA联合 FISH在 DMD基因突变产前诊断中 的价值探讨米 侯红瑛 ， 章 钧 ， 范建辉 ， 滕奔琦 ， 尹玉竹 ， 王 静 (中山大学附属第三医院妇产科，广东 广州 510630；中山大学达安基因诊断中心，广东 广州 510080) [摘 要] 目的：分别采用多重连接探针扩增技术 (MLPA)与荧光原位杂交技术 (FISH)针对外周血及羊水 标本分析杜氏／贝氏肌营养不 良(DMD／BMD)患者DMD基因缺失／重复突变的类型。分析在 DMD／BMD产前诊断 中两者联合应用的诊断价值。方法：对2009年 1月一2010年 1月在我院行基因诊断的3个 DMD／BMD家系共 5 位先证者及其 15位女性亲属采用MLPA进行DMD基因的分析，获得缺失／重复片段范围，再通过BAC克隆制备相 应区段的直标型FISH探针，并用X染色体着丝粒探针作为对照。分别采取MLPA和FISH技术对羊水标本进行检 测，与分娩后取样的MLPA检测结果进行对照。结果：MLPA与FISH技术检测效果在外周血中完全一致，但 3例 羊水标本中采用MLPA进行检测有 1例无法满足分析要求，1例出现假阳性结果，另 1例为真阴性结果，MLPA联 合用FISH检测结果均正确。结论：MLPA和FISH检测DMD基因缺失／重复在外周血中都能够获得准确的结果， 但对于羊水标本MLPA联合FISH进行检测的准确性更高。 [关键词] 肌营养不 良，杜氏；多重连接探针扩增；荧光原位杂交 [中图分类号] R714．55 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2010．10．005 PredictivevalueofM LPA combinedwith FISH inprenataldiagnosis0f DM D／BM D HOUHong—yin ，ZHANG Jun ，FAN Jian—hui，TENG Ben—ql一，YIN Yu—ZU ， WANGJin (DepartmentofC~necologyandObstetrics，TheThirdAffiliatedHospitalofSunYat—senUniversity，Guangzhou510630， China；DaanGeneDiagnostciCenterofSunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China．E—mail：gdgzhhyy@163． corn) [ABSTRACT] AIM：TodetectDuchennemusculardystrophy(DMD)geneticdeletion／duplicationfromthepe— fipheralbloodandamnioticfluidinthepatientsofDMD／Beckermusculardystrophy(BMD)byusingmultipleligation probeamplification(MLPA)andfluorescentinsituhybridization(FISH)，andtoanalyzethepredictivevalueofthesetwo techniquesinprenataldiagnosisofDMD／BMD．METHODS：Fivepatientsand15oftheirfemalerelativesfrom 3DMD／ BMD familieswereselectedandMLPA analysiswasconducted．Deletions／duplicationregionswereusedasdirectionsfor producingFISH probeslabelingfrom BACclones，withtheXchromosomalc