C反应蛋白对人外周血CD14%5e＋单核细胞TLR4信号转导的影响.pdfVIP

· 56 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(1)：56—6l [文章编号] 1000—4718(2011)01—0056—06 C反应蛋 白对人外周血 CD14+单核细胞 TLR4信号转导的影响木 彭 隆， 罗艳婷 ， 刘金来 (中山大学附属第三医院心内科，广东 广州 510630) [摘 要] 目的：观察 C反应蛋白(CRP)对CD14 单核细胞 Toll样受体4(TLR4)表达的影响，以探讨 CRP 在急性冠脉综合征(ACS)致炎机制中的作用。方法：不同浓度 (5、25、50、100mg／L)和不同作用时间(6、l2、24、48 h)的CRP刺激正常人外周血 CDI4单核细胞，或者不同浓度TLR4抑制剂预先干预 CD14单核细胞后 ，再给予 CRP刺激。应用流式细胞仪检测细胞表面TLR4蛋白的表达，定量 PCR方法检测 TLR4mRNA和髓样分化蛋白2 (MD一2)mRNA表达，ELISA检测刺激前后细胞上清液肿瘤坏死因子 ot(TNF—ot)、白细胞介素6(IL一6)、金属蛋 白酶9(MMP一9)水平。结果：CRP可剂量依赖和时间依赖地增加 CD14单核细胞表达TLR4和MD一2，高浓度 TLR4抑制剂可完全阻断CRP对 TLR4、MD一2的影响。TNF一0、【IL一6、MMP一9与TLR4、MD一2也呈现相同的变 化。结论：CRP可激活正常人 CDI4单核细胞 TLR4信号转导途径，并诱导产生TNF—ot、IL一6、MMP一9，提示 CRP可作为病原相关分子模式(PAMP)，通过TLR4模式受体介导而产生炎症反应，参与动脉粥样硬化形成，促进 ACS炎症的发展。 [关键词] c一反应蛋白质；受体，Toll样；单核细胞；急性冠脉综合征 [中图分类号】 R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．01．01l Effects0fC—reactiveprotein onsignaltransductionofToll—likerecep- t0r4inCD14 monocytes PENGLong，LUOYan—ting，LIUJin—lai (DepartmentofCardiology，TheThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Gnangzhou510630，China．E—mail： lai@medmail．corn．cgt) [ABSTRACT] AIM ：ToobservetheinfluenceofC—reactiveprotein(CRP)ONToll—likereceptor4(TLR4) expressioninCD14 monocytes，andtoinvestigatetheroleofCRPintheinflammatorymechanism ofacutecoronarysyn- drome(ACS)．METHODS：MonocyteswereisolatedfromperipheralbloodofhealthyvolunteersbyFicolldensitygradient centrifugation．ThecellswerestimulatedwithCRPatdifferentdoses(5，25，50，100mg／L)anddifferentexposuretime (6h，12h，24hor48h)．TLR4inhibitoratdifferentdoseswasco—incubatedwiththecellsinthepresenceofCRP． TheproteinexpressionofTLR4wasmeasuredbyflow cytometry，andthemRNA expressionofTLR4andMD一2wasdeter- minedbyquantitativereal—tim