cPKCγ-HSP60信号通路参与小鼠脑低氧预适应.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(6)：1066—1070 [文章编号] 1000-4718(2011)06—1066—05 cPKCv—HSP60信号通路参与小鼠脑低氧预适应木 蒋淑君 ， 张 楠 ， 李俊发 (。滨州医学院生理学教研室，山东 烟台264003；首都医科大学神经生物学系，北京 100069) [摘 要] 目的：鉴定参与低氧预适应 (HPC)的常规型蛋白激酶c (cPKC~／)相互作用蛋白，探讨与cPKC~／ 相互作用的热休克蛋白60(HSP60)表达水平在小鼠脑低氧预适应和脑缺血中的变化。方法：健康雄性BALB／c小 鼠，随机分为：常氧组(Norm)和 HPC组 ，结合是否进行大脑中动脉阻塞 (MCAO)分为常氧假手术组(Nomr + sham)、常氧缺血组 (Nomr +I)、HPC假手术组 (HPC+sham)和 HPC缺血组 (HPC+I)。应用整体低氧预适应和 MCAO缺血模型，结合免疫沉淀、双向凝胶电泳、质谱等技术分离、鉴定与cPKC~／相互作用的蛋白；利用蛋白印迹技 术分析 HSP60蛋白表达量在脑 HPC和缺血中的变化。结果：与常氧组比较，HPC小 鼠脑皮层膜相关成分中与 cPKC7相互作用的HSP60蛋白表达量升高，经免疫共沉淀证明cPKC~,与HSP60存在相互作用。在MCAO缺血模 型中，与Nomr +sham组小鼠相比，Nomr +I组及 HPC+I组小鼠皮层缺血核心区、半影区HSP60表达水平明显升高 (P0．05)。HPC+1组小鼠缺血核心区HSP60表达水平低于Norm+I组 (P0．05)。结论：研究结果表明， cPKC~／一HSP60信号通路可能参与了低氧预适应的发生发展过程。 [关键词] 常规型蛋白激酶C,／；蛋白质组；热休克蛋白60；低氧预适应；大脑中动脉阻塞 [中图分类号] R339．5 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．06．005 cPKC~／——HSP60signalpathwayparticipatesinhypoxicpreconditioningin m lCe JIANGShu—inil，ZHANGNan，LIJun一 (DepartmentofPhysiology，BinzhouMedicalUniversity，Yantai264003，China；DepartmentofNeuroboilogy，Capital MedicalUniversity，Belling100069，China．E—mail：jiangshujunl@163．corn) [ABSTRACT] AIM：Toidentifytheproteinsinteractedwithconventionalproteinkinasec^y(cPKC~／)whicharc involvedinhypoxiepreconditioning(HPC)，andtoinvestigatetheroleofcPKC,／一interactedheat—shockprotein60 (HSP60)inthedevelopmentofHPCandischemia(I)．METHODS：HealthymaleBALB／cmicewererandomlydivided intonomroxia(Nomr )andHPCgroups．Basedonwhethermiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)wasperfomred，the miceweredividedintoNorm+shamgroup，Nomr +Igroup，HPC+shamrgoupandHPC+Irgoup(alln=6)．Immuno- precipitation，two—dimensionalelectrophoresisandmassspectrometry wereappliedtoidentifytheproteinsinteractedwith cPKC,／．Thechnageso