泛素蛋白酶体途径对高糖刺激的肾系膜细胞Smad7表达的影响.pdfVIP

· 572 · 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysio~logy 2009三 (3)：5—72-—576 [文章编号] 1000—4718(2009)03～0572—05 泛素蛋 白酶体途径对高糖刺激的肾系膜 细胞 Smad7表达的影响术 马红艳， 徐 勇 ， 徐 玲， 杨 军， 徐 芬 (泸州医学院附属医院内分泌科，四川 泸州 646000) [摘 要] 目的：观察不同浓度高糖刺激后大鼠肾系膜细胞胞内Smad泛素化调节因子一Smurf2和Smad7的 表达，并以蛋白酶体特异性抑制剂MG132作为阻断剂，探讨泛素化降解在Smad信号中的作用。方法：将体外培养 的大鼠肾小球系膜细胞分别设正常对照组 (葡萄糖浓度 5．6mmol／L)、20mmol／L高糖组 、30mmol／L高糖组、30 mmol／L高糖加蛋白酶体抑制剂 MG132组等。用细胞免疫荧光染色法及激光共聚焦显微镜检测各组细胞泛素连接 酶Smurf2及Smad7的表达。结果：(1)正常组细胞 Smurf2蛋 白表达较弱 (25．93±3．35)，Smad7蛋 白表达较强 (64．09±7．43)。(2)高糖组 Smurf2表达较正常组增强 (P0．05)，呈浓度依赖性，荧光灰度值分别为20mmol／L 高糖组(56．99±7．00)、30mmol／L高糖组(96．36±9．19)；Smad7表达减弱(P0．05)，呈浓度依赖性 ，分别为20 mmol／L高糖组 (45．33±6．67)、30mmoLeL高糖组 (30．2O±4．41)。(3)30mmol／L高糖组加入MGI32后 ，Smurf2 表达减弱、Smad7表达增强。结论 ：(1)高糖可诱导肾系膜细胞Smurf2表达增强，Smad7表达减弱。(2)MG132可 阻止高糖所导致的上述变化。提示泛素一蛋白酶体途径参与了糖尿病肾病Smad通路的信号调节。 [关键词] 高糖；肾小球系膜细胞 ；Smad7；泛素一蛋白酶体途径 [中图分类号] R587．2 [文献标识码] A Effectofubiquitin--proteasomepathwayon expression ofSmad7in cul- turedglomerularmesangialcellsinducedbyhighconcentrationofglucose MAHong—yan，XUYong，XULing，YANGJun，XUFen (DepartmentofEndocrinology，TheAffiliatedHospital，LuzhouMedicalCollege，Luzhou466000，China．E—mail： ． xbwin@163．com) [ABSTRACT] AIM ：ToobservetheexpressionofSmad7andSmadubiquitionregulatoryfactor—Smurf2inrat glomerularmesangialcells(GMC)stimulatedbythehighconcentrationof ucose，andtoinvestigatetheeffectoftheubiq— uitiononSmadsignalingbyaddingMG132asaproteasomedifferentialinhibitor．METHODS：CulturedratGMCweredi— videdintonormalgroup(theconcentrationof ucose：5．6mmol／L)，highglucosegroup(20mmol／L，30mmol／L，re— spectively)，therapyrgoup(30mmol／LglucosewithMG132)．TheexpressionsofSmurt2andSmad7ineachgroupwere measuredbyindirectimmunofluorescenceandlaserscanningconfoeal microscope．RESUL