腹泻型肠易激综合征模型大鼠肠道Cajal间质细胞的变化及意义.pdfVIP

ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(11)：至 二 ! · 2263 · [文章编号] 1000—4718(2008)11—2263—03 腹泻型肠易激综合征模型大鼠肠道 Cajal 间质细胞的变化及意义冰 韩 真， 王运东 (皖南医学院附属弋矶山医院消化内科，安徽 芜湖 241001) [摘 要] 目的：通过检测肠壁组织中酪氨酸激酶受体 c—kit蛋 白(c—kit)的表达及分布，观察 cajal间质 细胞在腹泻型肠易激综合征模型大鼠小肠、回盲部及结肠中的变化，并初步探讨其变化在肠易激综合征中的意义。 方法：通过对新生大鼠结直肠扩张(eoloreetaldistension，CRD)制备肠易激综合征模型，40d后观察大便性状；通过 腹壁回撤反应(abdominMwithdrawalreflex，AWR)评分评估内脏敏感性；小肠、回盲部及结肠组织常规HE染色，光 镜下观察病理学变化；免疫组化检测肠壁组织中c—kit的表达及分布。结果：实验组大鼠大便Bristol评分明显升 高；在相同压力的直肠刺激下AWR评分明显高于对照组 ；小肠、回盲部及结肠组织的c—kit表达显著增强。结论： 新生大鼠结直肠扩张可以制备肠道分泌、运动和内脏敏感性均增强的肠易激综合征模型；o,jal间质细胞可能在腹 泻型肠易激综合征发病中有重要的意义。 [关键词] 肠易激综合征；Cajal间质细胞 [KEYWORDS] Irritablebowelsyndrome；InterstitialcellsofCajal [中图分类号] R856 [文献标识码] A 肠易激综合征 (irritablebowelsyndrome，IBS)是一种 以 国家标准固体混合饲料喂养，自由饮食。应激组仿Lin等 腹痛或腹部不适伴排便习惯改变为特征的功能性肠病 ，主要 的新生大鼠肠道刺激的方法，在新生鼠8—16d隔天PDCA 是胃肠动力和内脏感知异常，其病因和发病机制尚不十分清 (3．5mmx2．0mm)球囊扩张结直肠，压力为60mmHg，每天 楚…。已知心理社会因素、脑 一肠轴神经 一内分泌调节功能 1次，每次持续 1min；对照组仅插管，不扩张。大鼠大便性状 失调以及影响该调节功能的肠道免疫系统的异常和肠易激 按 Bristo1分级进行描述 ：1级为分离的硬团；2级为团块状；3 综合征可能有一定的关系 。现在 IBS的动物模型虽然较 级为干裂的香肠状 ；4级为柔软的香肠状；5级为软的团块；6 多，但是多没有特异性 ，本实验通过对新生大鼠结直肠扩张 级为泥浆状；7级为水样便。其中 1、2、3、6、7级为异常，4、5 (colorectaldistension，CRD)制备肠易激综合征模型，结合大 级为正常；大鼠行为学评价根据结肠扩张刺激时AWR评分 ： 鼠的肠道运动和内脏敏感性分析，并对肠组织常规 HE染 用双0号手术线将避孕套的储精囊固定于造影导管(5F)末 色 ，光镜下观察病理学变化；免疫组化检测肠壁组织中c—kit 端 ，插入大鼠肛门内1em，三腔管连接压力表，分别将压力打 的表达及分布，探讨 Cajal间质细胞在腹泻型肠易激综合征 至20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHg，并计分。0分：大 大鼠模型小肠 、回盲部及结肠中的变化及意义。 鼠对结肠扩张时无行为学的反应；1分：结肠扩张时身体静止 不动，头部运动减少；2分：结肠扩张时腹部肌肉收缩，但腹肌 材 料 和 方 法 未抬离桌面；3分：结肠扩张时腹肌收缩并抬离桌面；4分 ：结 1 材料 肠扩张时骨盆抬起，身体呈 弓形 ；免疫组化：断头处死大鼠， 新生Sprague—Dawley大 鼠(雌、雄不限)、母鼠，购 自南 取出空肠上段、回盲部、降结肠经 10％甲醛固定，常规脱水 ， 京医药大学实验动物中心；兔抗鼠C—kit多克隆抗体购