丹酚酸B保护缺糖缺氧／复糖复氧神经元的作用机制研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(2)：275—279 · 275 · [文章编号] 1000-4718(2009)02—0275—05 丹酚酸 B保护缺糖缺氧／复糖复氧 神经元的作用机制研究水 汪 芸 ， 蒋玉凤 ， 黄启福 ，崔 巍 ， 蔡大勇 ， 王玺玫 (北‘京中医药大学病理教研室，北京 100029； 北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室，北京 100700) [摘 要] 目的：通过建立大鼠皮层神经元缺糖缺氧／复糖复氧性损伤模型，探讨丹酚酸B保护神经元的作 用机制。方法：将原代培养的大鼠皮层神经元随机分为正常组、缺糖缺氧／复糖复氧组和丹酚酸B治疗组，复制缺 糖缺氧3h后复糖复氧24h的细胞模型。采用MTr法观察神经元的活性 ，比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率， 流式细胞仪检测线粒体膜电位 (MMP)及细胞凋亡率 ，激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内游离钙水平，以及 Hoechst 33342染色观察细胞核的形态变化。结果：与缺糖缺氧／复糖复氧组相比，丹酚酸 B可提高神经元的活性、存活率 以及MMP荧光值(P0．05，P0．01)，同时可降低LDH漏出率、细胞内钙荧光强度和凋亡率(P0．O1)；荧光染 色显示，丹酚酸B可减轻缺糖缺氧／复糖复氧诱导的细胞核的损伤。结论：维持 MMP和钙稳态可能是丹酚酸 B保 护缺糖缺氧／复糖复氧处理的神经元的作用机制。 [关键词] 神经元；丹酚酸B；线粒体膜电位；钙；细胞凋亡 [中图分类号】 R285．5 [文献标识码] A EffectsofsalvianolicacidB on neuronsduringoxygen／glucosedepriva- tionandreintroduction WANGYun，JIANGYu—feng，HUANGQi—fu，CUIWei，CAIDa—yong，WANG Xi—me1。 (DepartmentofPathology，BeringUniversityofChineseMedicine，Beijing100029，China；KeyLaboratoryofChinese InternalMedicine，MinistryofEducationofChina，DongZhiMenHospital，BejiingUniversityofChineseMedciine，Beng 100700，China．E—mail：jiangyf66@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM：Toobservethedamageinducedintheprimaryculturedratcorticalneuronsbyoxygen／glu— cosedeprivationandreintroduction，andtoinvestigatetheneuroprotectivemechanism ofsalvianolicacidB (SalB)． METHODS：Primaryculturedratcorticalneuronswererandomlydividedintothecontrolgroup，themodelrgoupandthe SalB group．Thecellmodelwasestablishedbyoxygen／glucosedeprivationfor3hfollowedoxygen／glucosereintroduction f0r24h．ThecorticalneuronsviabilitywasdeterminedbyMTIassay．Theleakagerateoflactatedehydrogenase(LDH) wasmeasuredbychromatometry．Themitochondrialmembranepotentials(MMP)andtheapoptosisratewerequantitatively analyz