鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-羟基脱氧鸟苷含量的变化.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(10)：2047—2049 [文章编号] 1000—4718(2009)10—2047—03 鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8一羟基 脱氧鸟苷含量的变化 黄元姣 ， 张贝贝 ， 马 宁 ， 玄 超 ， 盛晓晓 ， 木村真理子 (广西医科大学医学科学实验中心，广西 南宁530021；铃鹿医疗科学大学保健卫生学部，日本 铃鹿市 510—0293； 三重大学疾学部环境与分子医学，日本 津市 514—8507) [摘 要] 目的：8一羟基脱氧鸟苷 (8一OHdG)是 DNA损伤性生物标志物。通过检测鼻咽癌患者血清和鼻 咽组织中8一OHdG的水平 ，初步探究鼻咽癌的发生和发展是否与DNA损伤有关。方法：利用抗8一OHdG单克隆 抗体，通过ELISA和免疫荧光组织化学方法分别检测鼻咽癌患者血清和鼻咽组织 中8一OHdG的水平。结果：8一 OHdG在鼻咽癌患者血清和组织中表达水平较高，与正常人血清和慢性咽炎组织比较差异显著 (P0．05)。结论： 结果提示鼻咽癌的发生和发展可能与8一OHdG的水平有关。8一OHdG有望成为辅助鼻咽癌诊断的一个生物标志 物 。 [关键词] 鼻咽肿瘤；8一羟基脱氧鸟苷 [KEYWORDS] Nasopharyngealneoplasms；8一hydroxy一2一deoxyguanosine [中图分类号] R766．3 【文献标识码] A 鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma，NPC)是我国常见的恶 ELISA分析。组织8一OHdG检测选取27位鼻咽癌患者中的 性肿瘤之一，广西属鼻咽癌高发区，处于全国大陆31个省 ／直 l9位[平均年龄 (44．0-4-4．9)岁，男性 10人，女性 9人j和 27 辖市 当 中的第 2位。鼻 咽癌 占广 西头颈恶性肿瘤 的 位对照组的 13位 [(42．3±3．3)岁，男性 11人，女性 2人]慢 62．65％，其中死亡人数 占广西恶性肿瘤死亡者的 11．56％， 性咽炎患者鼻咽部组织，并做成石蜡切片，用于8一OHdG的 位居广西主要恶性肿瘤顺序第3位 ，仪次于肝癌、胃癌。 荧光免疫组织化学分析。 1．2 仪器 酶标仪 (MultiskanMK3，Thermo)；激光扫描共聚 8一羟基脱氧鸟苷 (8一hydroxy一2 一deoxyguanine，8一 OHdG)是活性氧类物质如羟 自由基 、单线态氧等攻击 DNA 焦显微镜系统 (FluoviewFV1000，Olympus)。 1．3 试剂 抗8一OHdG单克隆抗体试剂购 自日本老化制御 分子中的鸟嘌呤碱基第 8位碳原子所致的核苷酸损伤。核苷 研究所 (JaICA)。 酸损伤可进一步导致基因突变 、高甲基化或低 甲基化等遗 2 方法 传学的改变 ，最终引起癌变的发生。本文采用高感度抗 8 2．1 ELISA法分析血清 8一OHdG 采血后尽量在短时间内 一 OHdG单克隆抗体，测定鼻咽癌患者血清中8一OHdG的含 分离血清，为除去血清中高分子成分的影响，用分子量 10000 量，并通过荧光免疫组织化学法对其鼻咽部组织中8一OHdG 的滤过膜 (YM一10，Milipore)进行滤过处理。96孔反应板中 的水平进行了检测，初步探索鼻咽癌的发生和发展是否与8 加入处理好的血清和 I抗各 50ixL／well，混匀后封膜4℃过 一 OHdG的含量变化有关 。