槲皮素对LPS诱导的体外培养肝细胞损伤的影响及机制.pdfVIP

· l142· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009 5(鱼)．142二 [文章编号] 1000-4718(2009)06—1142-05 槲皮素对 LPS诱导的体外培养肝细胞 损伤的影响及机制术 矫 强 ， 郭竹英 ， 徐芒华， 王世婷 ， 高丰厚 (上海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心，上海201900) [摘 要] 目的：通过体外观察擀皮素对脂多糖 (LPS)所致肝细胞损伤和肿瘤坏死因子(TNF—a)表达的影 响，探讨槲皮素的作用及其机制。方法：胶原酶灌流分离培养大鼠肝细胞，40mg／LLPS诱导损伤，同时用0．5—10 Ixmol／L浓度槲皮素进行干预，作用24h后 ，四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT)、PI—AnnexinV染色检测肝细胞的增殖 凋亡比例、测定上清液乳酸脱氢酶含量，ELISA、RT—PCR方法检测TNF—d表达。结果：40mg／LLPS作用于原代 培养大鼠肝细胞24h后 ，与对照组相比，细胞生长抑制率达27％，细胞总凋亡率30．2％，培养上清液 LDH含量增 加20倍，TNF一0LmRNA和蛋白表达明显增加(P0．05)。给予0．5—10i~mol／L槲皮素后，各项指标有明显下降， 且呈量效关系。结论：0．5—10I~mol／L槲皮素拮抗LPS所致的肝细胞损伤，其保护作用的机制可能与抑制TNF一0【 的表达有关。 [关键词] 槲皮素；肝细胞；脂多糖类；肿瘤坏死因子 [中图分类号] R363．2 [文献标识码] A Effectsofouercetinonlipopolysaccharideinducedhepatocyteinjury vitro JIAOQiang，GUOZhu—ying，XUMang—hua，WANGShi—ting，GAOFeng—hou (ExperimentalCenter，No．3PeoplesHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotong ￡钾 SchoolofMedicine，Shanghai 201900，China．E—mail：zyguoo@126．corn) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheeffectsofquercetinonlipopolysaccharide(LPS)inducedhepatocyteinjuryand theexpressionofTNF—dinvitro．METHODS：Hepatocyteswereisolatedfrom maleSprague—Dawleyratsbycollagenase perfusion．LPs!atconcentrationof40mg／Lwasusedtoinduceinjurytotheculturedcells．and0．5—10izmol／Lquereetin wasaddedatthesametime．After24hofincubation，thecellapoptosisratesweredetectedbyMTYandPI—AnnexinV． LDH andTNF— weremeasuredbykits．RESULTS：40mg／LLPScauseda27％ growthinhibition．Theapoptosisrate was30．2％ ．LDHleakagewas20foldshighel-thannorma1．TNF— expressionsignificantlyincreased．Treatedwithquer- cetinatdosesof0．5—10i~mol／L，theapoptosisrate，LDH leakageandTNF— expressioninhepatocyteswere attenuated inadosedependentmanner．CONCLUSION：0．5～10ixmol／Lofquercetinprotectshepatocytesfrominjuryinducedby LPS．whichisassociate