槲皮素对毒胡萝卜素诱导的巨噬细胞内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制.pdfVIP

· 518 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28 [文章编号] 1000-4718(2012)03—0518—06 槲皮素对毒胡萝 卜素诱导的巨噬细胞 内质 网应激凋亡途径的抑制作用及机制 岳 雯 ， 姚树桐 ，鲍 颖 ， 王gg， 杨娜娜。， 商战平 (泰山医学院 病理生理学教研室，泰安市中心医院心血管内科 ，动脉粥样硬化研究所，山东 泰安271000) [摘 要] 目的：研究槲皮素(quercetin，Que)对毒胡萝 卜素 (thapsigargin，TG)诱导的巨噬细胞 RAW264．7 内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制。方法：1~Imol／LTG作用 RAW264．7细胞24h诱导内质网应激，不同浓 度Que(80、120或 160wmol／L)与TG共同作用后 ，MTr法检测细胞存活率，流式细胞术检测凋亡率及[ca ]i，激 光共聚焦显微镜观察细胞形态变化，Westernblotting法检测糖调节蛋白78( cose—regulatedprotein78，GRP78)及 C／EBP同源蛋白(C／EBPhomologousprotein，CHOP)的表达；Westernblotting法检测Que(160p~mol／L)和 (或)磷脂 酰肌醇3一激酶(phosphatidylinositol3一kinase，PI3K)抑制剂 LY294002(15nmol／L)与 TG共 同作用时 GRP78和 CHOP的表达。结果：Que能够抑制TG诱导的RAW264．7细胞内质网应激损伤，与TG组相比，细胞存活率升高 (P0．05)，凋亡率降低 (P0．05)，[ca“]i降低 (P0．05)，GRP78及 CHOP表达减少(P0．05)；LY294002单 独作用可抑制TG诱导的GRP78及CHOP表达上调(P0．05)，但与Que联合应用与二者单独使用时抑制作用无 显著差异。结论：Que可以抑制TG诱导的RAW264．7细胞内质网应激凋亡途径 ，该作用可能与其抑制PI3K信号 通路从而降低CHOP蛋白的表达有关。 [关键词] 槲皮素；内质网应激；巨噬细胞 ；细胞凋亡；磷脂酰肌醇3一激酶 [中图分类号] R332 [文献标志码】 A doi：103969／j．issn．1000—4718．2012．03．023 ProtectiveeffectofquercetinonER stress—-relatedapoptosisinducedby thapsigargininmacrophages YUEWen ，YAO Shu—tong ，BAO Ying ，WANGJia—fu ，YANG Na—na ，SHANG Zhan—ping (DepartmentofPathophysiology，DepartmentofCardiovascularMedicine，砒 CentralHospitalofTaian，InstituteofAthero— sclerosis，TasihanMedicalCollege，Taian271000，China．E—mail：zhpshang@tsmc．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsandpossiblemechanismsofquercetin(Que)onendoplasmicreti— culumstress(ERS)一relatedapoptosisinducedbythapsigargin(TG)inRAW264．7cells．METHODS：ERstressof RAW264．7cellswereinducedbyTG atconcentrationof1p~mol／Lfor24h．Aftertreatedwithdifferentconcentrationsof Que(80，12oand160~mol／L)，thecellviabilitywasdeterminedbyMTYassay．Theapoptoticrateandthechangesofin-