虎杖苷抗肺缺血再灌注损伤作用及对磷酸化蛋白激酶Cα调节的实验研究.pdfVIP

维普资讯 · 384 · 理生理 圭 chineseJournalofPathophysiology 2008，24(2)：384—387 [文章编号] 1000—4718(2008)02—0384—04 虎杖苷抗肺缺血再灌注损伤作用及 对磷酸化蛋 白激酶 C0调【节的实验研究 y_2r~ ， 张晓隆 ， 徐正榆。^， 王万铁 ， 郝卯林 (温州医学院 病理生理学教研室，。医院管理科，浙江 温州325035) [摘 要] 目的：探讨虎杖苷(PD)抗肺缺血再灌注损伤作用及对磷酸化蛋白激酶Ca(PKCot)活性调节。方 法：采用在体单肺原位缺血再灌注损伤模型。健康 日本大耳白兔40只随机均分成假手术对照组 (sham组)、肺缺 血再灌注组 (I／R组)、肺缺血再灌注+虎杖苷组 (PD组)、肺缺血再灌注+PD+多粘菌素B组 (PMB组)。各组在 不同时点抽血检测丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性。实验末 ，测湿干重 比(W／D)，计算肺泡损伤 率 (IAR)，电镜观察细胞超微结构改变，免疫组化分析磷酸化 PKCot表达情况。结果：①L／R组和PMB组血清SOD 活性降低无明显差异 ，PD组显著高于I／R组(P0．01)；而 MDA的上升PD组显著慢于 I／R组、PMB组 (P0．05 或P0．01)。② PD组的W／D与 IAR均显著低于 IR组和PMB组 (均P0．01)。③ 电镜提示 PD组损伤程度明 显轻于 IR组及PMB组。④除I／R组外，免疫组化显示磷酸化 PKCot皆阴性表达。结论：PD对 LIRI具有防治作 用，其机制除抗氧化损伤外可能还与抑制PKCot活化有关。 [关键词] 虎杖苷；肺 ；再灌注损伤 ；蛋白激酶Ca [KEYWORDS] Polydatin；Lung；Referfusioninjury；ProteinkinaseCa ． [中图分类号] R363 [文献标识码] A 肺缺血再灌注损伤 (1ungisehemia／reperfusioninjury，LI— 断左肺门1h，松开阻断带行再灌注 3h。于缺血前20min RI)的研究方兴未艾，对其防治的探索突显重要 J。已往的 (pre—ischemia，pre—I)、缺血 1h(ischemia1h，I1)，随即再灌 研究表 明，中药单体虎杖苷 (polydatin，PD)对蛋 白激酶 C 注第 1h、2h、3h(reperfusionlh、2h、3h，R1、R2、R3)，各时点 (proteinkinaseC，PKC)总的活性有调节功能 ，而 PKC是缺 分别抽血；再灌注末取左肺组织标本。其余各组均按此操作； 血再灌注 (ischemia／reperfusion，I／R)中的关键信号分子，但 (3)I／R+PD组 (PD组，，l=10)，在 pre—I和再灌注即刻按 2．5 PD对 LIRI中PKC的干预尚未见报道。本实验预观察 LIRI ms／kg静脉注射 0．2％PD溶液 ；(4)I／R +PD+PMB组 中PD的拮抗作用并进一步检测 PD对 PKCot亚型的调节情 (PMB组 ，，l=10)，在给PD同时按 42 ms／kg静注PMB。 况，为其在临床应用提供理论依据。 3 血清SOD活性及MDA含量的测定 SOD活性及 MDA含量测定均按试剂盒说明书操作。 材 料 和 方 法 4 肺 干重比测定 1 实验动物与主要试剂 取部分肺组织漂洗后，滤纸吸干多余水分 ，称重为湿重。 健康 日本大耳白兔40只，雌雄不拘，体重 1．7—2．7kg， 在恒温电热鼓风干燥箱70℃ 24h烘干称重为干重，两者之 温州医学院实验动物中心提供。PD(陕西赛德高科生物股份 比为