磷酸化的细胞周期相关蛋白在大鼠海马神经元发育和老化过程中的表达.pdfVIP

· 1528· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2 堑(2；垫二 丝 [文章编号] 1000—4718(2009)08—1528—05 磷酸化的细胞周期相关蛋 白在大鼠海马神经元 发育和老化过程 中的表达术 解翠红 ，‘ 王 伟 ， 杜晓萍 (华中科技大学同济医学院附属同济医院 急诊内科，神经内科，湖北 武汉430030) [摘 要】 目的：观察正常Wistar大鼠发育及老化过程中海马神经元磷酸化的细胞周期相关蛋白的表达，探 讨这一过程中海马神经元的细胞周期的变化以及磷酸化细胞周期相关蛋白在其中的调控作用。方法：采用免疫荧 光方法观察不同发育时期 (1天、11天、1月、3月 、l5月)磷酸化周期素依赖激酶2(CDK2)、磷酸化细胞分裂周期 激酶2(CDC2)、磷酸化视网膜母细胞瘤 (Rb)蛋白表达的规律，并应用Westernblotting方法测定不同阶段大鼠海马 内磷酸化CDK2、磷酸化CDC2、磷酸化Rb的含量。结果：在各年龄组中神经元特异性核蛋白(NeuN)阳性细胞数量 随着年龄增加而逐渐减少，提示神经元数量随年龄的增加而逐渐减少。磷酸化 CDK2、磷酸化Rb阳性细胞的数量 随着年龄增加而逐渐增多，老年组增加明显 ，与其它各组间有显著差异，磷酸化CDC2阳性细胞在各年龄组神经元 中表达量均较低；蛋白定量亦提示老年组磷酸化CDK2、磷酸化 Rb的含量较其它组明显增高。结论：海马神经元数 量随年龄增加逐渐减少，而其中磷酸化CDK2和磷酸化Rb却随年龄的增长逐渐增多，提示老化过程中部分神经元 再次进入细胞周期，说明磷酸化细胞周期相关蛋白可能参与了这一过程中海马神经元的凋亡。 [关键词】 细胞周期蛋白质依赖激酶K；视网膜母细胞瘤蛋 白质；神经元；海马 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Expression0fph0sph0rylatedcellcyclerelatedproteinsindevelopingand agmgrathippocampus XIE Cui—hong ，WANG Wei，DU Xiao—ping (DepartmentofEmergency，DepartmentofNeurology，Affiliatedron~iHospitalofTongfiMedicalCollege，HuazhongUni- versityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China．E—mail：hongersnow@yahoo．com．ca) [ABSTRACT] AIM：Toobservetheexpressionofphosphorylatedcellcyclerelatedproteinscyclin—dependentki- Base(CDK)andtheretinoblastomaprotein(Rb)inthedevelopingandagingrathippoeampus．METHODS：Theimmu- nofluorescentstainingforanti—phospho— CDK2，anti—phospho— CDC2，anti—phospho—Rbandanti—NeuNantibod· ieswasusedtodeterminetheirexpressionsanddistributionsinWistarrathippoeampusatdifferentages．Theexpressionsof phosphorylatedcellcyclerelatedproteinswerealsoassessedbyWesternblottinganalysis．RESULTS：(1)Thenumberof neuronsofCA1areainhippocampusdecreasedduringtheperiodfrom1dayto15months．(2)Thepositiveexpressionsof phospho—CDK2andphospho—Rbincreasedwithagin