人基因重组骨形成蛋白-2对牙周韧带细胞群成纤维表型影响.docVIP

人基因重组骨形成蛋白-2对牙周韧带细胞群成纤维表型的影响 　　作者：谢成婕 王贻宁 　　【关键词】 人基因重组骨形成蛋白-2 　　［摘要］ 目的：探讨人基因重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对牙周韧带细胞群（PDLC）成纤维表型的影响。方法：PDLC在含不同浓度的rhBMP-2的培养液中培养，采用免疫细胞化学技术做表皮生长因子受体（EGFR）的检测，并用图像分析软件分析EGFR表达的强弱。结果：rhBMP-2作用下，PDLC的EGFR的表达有变化（P0.05），25~100 Μg/L组EGFR的表达减弱，100 Μg/L组最弱，随rhBMP-2浓度上升，EGFR的表达又有增强的趋势。结论：rhBMP-2对PDLC的成纤维表型产生了影响，合理剂量的rhBMP-2应用可以保证PDLC成纤维表型的较高表达，使种植体周牙周韧带的构建成为可能。 　　［关键词］ 人基因重组骨形成蛋白-2 牙周韧带细胞群 成纤维表型 表皮生长因子受体 　　Effects of Recombinant Bone Morphogenetic Protein-2 on Fibroblastic Phenotype of Periodontal Ligament Cells Population. 　　XIE Cheng-jie, WANG Yi-ning. 　　School of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430079 　　［Abstract］Objective: To explore the effects of rhBMP-2 on the fibroblastic phenotype of PDLC. Methods: PDLC were incubated under different concentration of rhBMP-2, the expression of EGFR was detected by immunocytochemistry technique, and then analyzed with HMIAS-1000 color image system. Results: rhBMP-2 had an effect on the expression of EGFR（P0.05）, which decreased in the range of 25Μg/l~100Μg/l rhBMP-2 and had the lowest expression at 100Μg/l rhBMP-2, but up-regulated as the concentration of rhBMP-2 increased. Conclusions: rhBMP-2 has an effect on the fibroblastic phenotype of PDLC, and the appropriate dose of rhBMP-2 can assure the stability of the fibroblastic phenotype , which makes it possible to construct periodontal ligament around dental implant. 　　［Key words］ rhBMP-2 PDLC population Fibroblastic phenotype EGFR 牙周韧带细胞群（periodontal ligament cells population,PDLC）是具有异质性的细胞群，可粗略的分为成骨表型和成纤维表型，这是将PDLC作为种子细胞构建组织工程化种植牙牙周膜的理论基础。大量文献证明人基因重组骨形成蛋白(recombinant bone morphogenetic protein,rhBMP-2)可以提高PDLC的碱性磷酸酶(ALP)活性,使其成骨表型增强，可望利用rhBMP-2促进种植牙牙周韧带结构形成。但是在rhBMP-2的作用下，PDLC的成纤维表型如何变化，rhBMP-2是否会使PDLC的成纤维表型完全丧失而导致种植牙牙周韧带结构失败？本实验拟探讨rhBMP-2对PDLC成纤维表型的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料和器械 高糖最低必须培养基（Gibco,美国），胰蛋白酶（sigma,美国），胎牛血清(Gibco,美国)，rhBMP-2(第四军医大学生化教研室)，表皮生长因子受体鼠抗人单克隆抗体，SP试剂盒，DAB试剂盒（北京中杉生物技术公司），超净工作台（苏州净安