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灵活使用HPLC的技巧
灵活使用HPLC的技巧
天美(中国)科学仪器有限公司 甄蕊
目 录
1 普通液相色谱的技巧
2 日常维护的技巧
03
1.普通液相的技巧
1.1 混合方法不同,保留时间的变化
1.2 放置时间不同,流动相组成的变化
1.3 溶液组成不同,混合难易选择混合器
1.4 试剂级别不同,对色谱图的影响
1.5 样品稀释剂与进样量的选择
1.6 色谱柱的性能与预柱
1.7 柱温箱性能对基线的影响
1.8 基线问题
1.9 使用离子对试剂,峰形产生的变化
04
1.普通液相的技巧
1.1 混合方法不同,保留时间的变化
1.2 放置时间不同,流动相组成的变化
1.3 溶液组成不同,混合难易选择混合器
1.4 试剂级别不同,对色谱图的影响
1.5 样品稀释剂与进样量的选择
1.6 色谱柱的性能与预柱
1.7 柱温箱性能对基线的影响
1.8 基线问题
1.9 使用离子对试剂,峰形产生的变化
05
1.1 混合方法的不同,保留时间的变化
如何调配 「H O :CH CN = 50 :50 」?
2 3
×纯水100mL,以乙腈定容到200mL 。
→H O :CH CN ≒50:53
2 3
×乙腈100mL,以纯水定容到200mL 。
→H O :CH CN ≒53:50
2 3
○分别称取100mL纯水和100mL乙腈,
然后混合。(如右图)
06
1.1 混合方法的不同,保留时间的变化
60 以乙腈定容
H2O:CH3CN = 50:50
40 以纯水定容
U
A
m
20
0
0 5 10 15 20 25 30
min
色谱柱 Hitachi Inertsil ODS-3 (4.6 ×250mm, 5mm) 进样量 20 μL
温度 40 ℃ 样品 DNPH- 乙醛[5mg/L]
流量 1mL/min 波长 360nm
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