不同通气条件下米根霉发酵产L-乳酸代谢调控.pdfVIP

http :// 同通气条件下米根霉发酵产L-乳酸的代谢调控1 姜绍通，郑志，罗水忠，潘丽军 合肥工业大学生物与食品工程学院，合肥 (230009 ） E-mail:j iangshaotong@ 要： 根霉发酵生产L-乳酸是一个好氧的代谢过程，供氧程度直接影响到葡萄糖对乳酸 的转化率。本文研究了不同摇瓶条件对米根霉发酵体系中LDH 与ADH 的酶活变化，以及 乳酸和乙醇转化率的影响，结果表明：当装液量从 10%增加到 30 ％，乳酸的产量及相应的 LDH 活力呈下降趋势，而乙醇浓度及ADH 活力随着装液量的增加而提高。摇床转速为220 r/min 时，乳酸产量最大，对应的LDH 活力也最大；摇床转速为160 r/min 时，乙醇产量与 ADH 活力较高。单膜封口发酵乳酸浓度与 LDH 活力分别比双膜封口发酵提高 64.4 ％和 49.9% ，而双膜封口发酵时乙醇最大浓度与最大 ADH 活力分别比单膜封口发酵提高 30.0% 和25.5% 。研究通过单因素实验在装液量20 ％，摇瓶转速220r/min 下可得到摇瓶下的最大 乳酸转化率，此时乳酸含量为68.14g/L ，LDH 活力为5.97U/mL ，乙醇浓度为16.28 g/L ，ADH 活力为15.44U/mL。 关键词： 米根霉；不同摇瓶条件；乳酸；乙醇 + 中图分类号 TQ921 . 3 1．引言 好氧微生物在发酵过程中，菌体对氧的消耗速率往往会很高，因此，氧的供应是影响发 酵生产效率的重要因素，其供给水平会直接影响到目标产物形成的效率，是代谢控制发酵中 [1] 需要研究的一项重要调控技术 。米根霉发酵生产L-乳酸是一个较复杂的代谢过程，发酵产 物主要有乳酸和乙醇。但供氧程度的不同，会影响到目标产物乳酸与主要代谢副产物乙醇的 [2] 分配，降低乳酸的转化效率 。较低的通 条件会使得菌体生长受到抑制，酒精发酵程度提 高，使得乳酸产量降低；较高的通 条件会使得兼性厌氧发酵过程受到抑制，因此在发酵过 [3] 程中菌株能够正常生长，保持菌体活力，能持续将葡萄糖转化为乳酸 。所以，研究米根霉 发酵过程中不同通气条件下LDH 与ADH 的酶活变化以及发酵终产物乳酸和乙醇的比例变 化，分析不同通气条件下碳代谢流变化情况，具有一定的实际意义。本实验通过研究摇瓶条 件下的装液量、摇床转速、封口膜等不同通气条件下米根霉发酵过程中LDH与ADH 的酶活 变化以及发酵终产物乳酸和乙醇的比例变化，分析不同通气条件下碳代谢流变化情况，研究 的结果为实现提高L-乳酸的发酵产率具有一定意义。 2 材料和方法 2.1 材料 米根霉 （Rhizopus oryzae ）AS 3.3461 ，购于广州微生物研究所菌株保藏中心。菌种保藏 采用PDA 培养基；发酵培养基组成为：葡萄糖 120 g/L，（NH ）SO