高效液相色谱法测定22S,23S,24R表高油菜素内酯.pdfVIP

高效液相色谱法测定22S?23S?24R表高油菜素内酯* 刘国清 张洪彬 刘建平 李 良 （云南大学化学系 昆明 650091） 2.2 色谱条件 1 前言 CLC-C8不锈钢柱 6（.mmi.d. 150mm 日 油菜素内酯 Brassinolide）类化合物2a3a， 本岛津；流动相：乙腈-水 8（0 20V/V ，流速： 22S，23S-四羟基-24R-乙基-B-高-7-氧杂-5a-胆甾6- 1mL/min；柱温：37；检测波长：UV 222nm；灵敏 酮，简称BR-120，是一种植物生长调节剂，对一些作 度：0.16AUFS。 物有明显的增产效果。其结构式为： 2.3 样品处理 （1准确称取一定量的BR-120原药，按比例 样（品：苯硼酸等于2.5 1）加入苯硼酸，用乙酸乙 酯溶解，于80℃水浴反应0.5h，配成浓度约为1mg/ mL的溶液。 2（BR-120标准溶液的配制：准确称取25.mg BR-120标准品，加入10.mg苯硼酸，反应条件同 上，配成1mg/mL的溶液。 3（内标液的配制：准确称取25.mg三苄基甲 该产品由云南大学化学系研制成功，并由云南大学 醇，用乙酸乙酯溶解后配成浓度为lmg/mL溶液。 南亚生物化工厂正式生产。衍生化在色谱法中的研 3 结果与讨论 究国外多有报道[1，2]。关于BR-120的分析方法， Takatsuto等[3]曾用萘硼酸与题示化合物进行衍生 3.1标准曲线的制作 化反应，然后用高效液相色谱 HPLC）法、紫外检测 准确吸取BR-120标准溶液0.20，0.40，0.60， 器测定。Gamoh等分别用1-氰基异吲哚-2-间-苯硼 0.80，?.001.20mL，各加入0.5mL内标液，用乙酸 酸[4]、9-菲硼酸[5]1-二甲氨基萘-5-磺酰硼酸[6]和二 乙酯稀释至 1mL。以峰面积比A（样/A ）对浓度 茂铁硼酸与题示化合物进行衍生化，然后分别用荧 m（g/mL）作图。其线性回归方程为Y=7.35X+ 光检测器[6 和电化学检测器[7]测定。我们研究了 0.00288 =0.9999。 苯硼酸与BR-120进行衍生化反应、用HPLC法及 3.2 BR-120原药含量坎定 紫外检测器测定的方法，此法用于BR-120原药和 准确吸取样品液1.mL，加入内标液 .5mL， 产品的分析，方法准确，结果令人满意。 用乙酸乙酯稀释至 0mL，取10L进样，结果见图 1。每个样品平行测定三次，结果见表1。 2 实验部分 2.1仪器与试剂 日本岛津LC-6A高效液相色谱仪；7125手动 进样器；紫外-可见光检测器；C-R3A数据处理机。 乙腈 HPLC淋洗剂，上海吴泾化工厂；乙酸乙 酯，AR；BR-120标准品、苯硼酸、三苄基甲醇均由云 南大学化学系有机合成研究所提供。BR-12原药和 产品 水（剂），均由云南大学南亚生物化工厂提供。 *云南省应用基础研究基金资助项目 本