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第 42 卷 第 2 期 厦门大学学报 自然科学版 Vol. 42 No. 2
2003 年 3 月 Journal of Xiamen University (Natural Science) Mar. 2003
·快 讯· 文章编号 (2003)
嗜水气单胞菌蛋白质组分子解剖图谱的初步建立
王三英 , 吴谋胜 ,陈晋安 ,陈子 ,彭宣宪
(厦门大学生命科学学院生物学系 , 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 , 福建 厦门 361005)
摘要 : 采用蛋白质组学技术 ,建立了嗜水气单胞菌 PPD ( 134/ 91) 在稳定期的蛋白质组分子解剖图谱. 将嗜水气单
胞菌接种于 LB 培养基 28 ℃培养 18 h ,取菌总蛋白进行 2D PA GE. 从 2D PA GE 图谱中随机选取 124 个蛋白质点
进行肽质量指纹图谱鉴定 ,检索发现其中 10 个确定为数据库中收录的嗜水气单胞菌的基因或蛋白 ,其比例约为
1/ 12. 实验结果对嗜水气单胞菌菌株之间的比较研究和功能蛋白质组研究具有重要参考价值.
关键词 : 蛋白质组学 ;嗜水气单胞菌 ;肽质量指纹图谱
中图分类号: Q 75 文献标识码 :A
嗜水气单胞菌严重危害水产动物养殖. 许多学 培养结束后 ,取 2 mL 菌液进行平板菌落计数. 其余
者对该病原菌的快速检测、生理代谢、所致疾病的病 培养液于 4 000 r/ min 离心 10 min , 收集菌体 ,用生
[1～5 ] (
理和防制等方面进行较系统的研究 . 近年来 , 理盐水洗涤菌体 3 次 , 称菌体重 ,再用以 1 :3 重量 :
分子生物学技术的快速发展为深入研究病原菌及其 ) (
体积 的比例加入超声破碎缓冲液 50 mmol/ L Tris
引起的疾病提供了重要手段 ,其中具有高通量特性 HCl ,1 mmol/ L ED TA) . 用 Virsonic 475 超声细胞
的蛋白质组学可以起十分重要作用[6 ] . 按蛋白质组 ( )
破碎仪 Vir Tis 公司产品 超声破碎.
学的研究思路 ,建立研究对象的分子解剖图谱 ,即所 1 . 3 实验菌生长曲线的测定
谓的参考图谱具有重要意义. 本文初步建立嗜水气 生长曲线的测定采用平板计数法测定. 细菌培
单胞菌的分子解剖图谱. 养同上.
1 . 4 双向凝胶电泳
1 材料与方法
双向电泳操作步骤 : 第一向预电泳 200V
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