碱性纤维母细胞生长因子对阿尔茨海默病细胞模型ERK12与PKCγ活性的影响.pdfVIP

墨蜇笠碱世堑丝堡塑盟生拯固王盟匝筮蓬煎熬痼绁瞧捷型!E!!丝塑丛虫渣蛙曲丝卿—釜鱼塑 645· 碱性纤维母细胞生长因子对阿尔茨海默病细胞模型ERKl／2和 PKC7活性的影响 吴哲赵艳华1 彭博2 罗晓光罗小萌3 (中国医科大学附属第一医院神经内科，辽宁 沈阳 110001) 【关键词]碱性成纤维细胞生长因子；13-淀粉样蛋白；细胞外调节蛋白激酶；蛋白激酶C1；阿尔茨海默病 【中图分类号)R749[文献标识码】A 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)可促进大脑皮质、海马、1-3实验方法 小脑以及多巴胺能、骨髓和感觉神经元存活…。FGF受体 1．3．1 Pcl2细胞培养及分组置于PRMI一1640培养基。 (FGFR)属酪氨酸激酶受体家族中成员，介导FGF信号进入细 ”℃、体积分数为5％C02培养箱孵育．3d换液1次，进行分 J、Ras— 胞．由hFGF／FcFR介导的信号转导途径包括：PKC【2 h。(2) 组。(1)正常对照组：取对数生长的PCI2细胞培养48 RafMEK．ERKL3】、JAK-STATp’和P13K途径”1。有研究显示．阿 AB损伤组：取对数生长的PCI2细胞加入终浓度为20ttmol／L 尔茨海默病(AD)患者大脑神经元蛋白激酶C(PKC)表达异常 h。(3)bFGF组：取对数生长的PCI2 的^良．。培养液。培养48 减少和ERKI／2表达异常增加”o。MAPK／ERK级联激活是AD 细胞加入含bFGF(终浓度分别为25、50、75和100 ne／L)及肝 早期病生理学特征，可能参与神经元退行性变的自我刺激过 索(终浓度为80ng／L)培养液，2h后滴加A13。。(终浓度为 程，以及这些条件下的错误修复…”。目前．尚无有关bFGF对 20 h。(4)PD98059抑制剂组：取对数生长的 psnol／L)培养48 AD模型细胞PKcl和ERKI／2表达和活性影响的文献报道．我 们采用A阢∞诱导PCI2细胞建立AD细胞模型，以探讨bFGF 100 rain后滴加bFGF(终浓度50ng／L)，培养至 trmol／L，60 对AD模型细胞PKC,t及ERKI／2表达和活性的影响，可望为 120 h。 min滴加A阢．”及肝索(终浓度80．g／L)，培养48 其临床治疗提供新的思路与途径。 I．3．2 MIT法检测Pcl2细胞存活率取对数生长期PCI2 细胞，经0．25％胰蛋白酶消化后制备单细胞悬液，以105个细 1材料与方法 胞／孔接种于96孔细胞培养板．每孔滴加1640培养基200出， 1．1细胞来源PCI2细胞株购自中科院上海细胞库。每3 置37℃、俸积分数为5％CO：培养箱培养24h，弃原培养液、以 天换液1次，5—6d传代1次。 无血清培养基冲洗两次，分别于对照组、AB损伤组和bFGF组、