单核细胞增生性李斯特菌mpl基因的克隆及其原核表达载体的构建.pdfVIP

第23卷 第 1期 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 23(1)：6062 2011年 2月 Jou rna1ofHei1on ian BayiAgricultural University ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ．．． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． gj g Feb．2011 ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． ． — — — — — 文章编号：1002—2090(2011)01—0060—03 单核细胞增生性李斯特茵mpl基因的克隆及其原核表达载体的构建 王璐璐 ．一，侯广玉 ，杨玉英 - (1．黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆 163319；2．哈尔滨维科生物技术开发公司；3 ． 牡丹江医学院) 摘 要：研究对单增李斯特菌Mpl蛋白进行了基因克隆及表达载体的构建。通过PCR方法对标准株单增李斯特菌菌株 唧 基 因进行扩增 ，并将其克隆至pET32a(+)上构建表达载体。经DNA序列测定分析，扩增出的基因与GenBank发表的单增李斯特 菌mpl基因序列EF183452和EF183453的同源性为99．7％，氨基酸同源性为 100％。试验成功地对单增李斯特菌株mpl基因进 行扩增，并将其克隆至pET32a(+)上，为下一步开展Mpl重组蛋白的应用研究奠定了基础。 关键词：单增李斯特菌；mpl基因；克隆 中图分类号：$852．61 文献标识码：A ExpressionvectorofListeriamonocytogenesandmplgenecloning W angLulu一．HouGuangyu~．s,YangYuying (1．CollegeofAnimalScienceandTechnology，HeilongjiangBayiAgriculturalUniversity，Daqing163319； 2．WeiKeBiotechnology；3．MudanjiangMedicalCollege) Abstract：ThisresearchwascarriedoutontheListeriamonocytogenesMplproteinthroughthegenecloning．Listerianmnocytogenes Mplgenewasamplifiedfrom typestrainbyPCRandclonedintoexpressionvecto~p‘ET32a (+)．ThenucleotidesequenceofListeria monocytogenesmplgenewascompared andanalyzedwithaccession No．EF183452andEF183453publishedpreviouslyinGene Bank．Sequenceanalysisshowedthatthegeneshared99．7％ nucleotidehomoloyg and 100％ AminoAcidhomology