实验 细胞膜的选择透性 .ppt

实验要求 1 实验报告网上提交 2 每次实验结束，桌面、地面收拾干净，由实验老师检察结果和李利老师检查实验用品后方可离去。 3 课代表安排每次实验后值日 4 注意实验室规范，注意安全，不乱动室内与本实验无关的东西。 周 日期 实验名称/任课教师 学时 需实验材料、易耗品 2 2.29 质膜的通透性观察 4 市售抗凝绵羊血、指管、NaCl、甲醇、乙醇、丙三醇、TritonX-100、三氯甲烷、蒸馏水、载片盒(20个) 3 3.7 烟草悬浮细胞或花粉管的内吞作用及内膜系统的检测 4 烟草悬浮细胞、花粉管、蔗糖、FM4-64(红色荧光)、硝酸钙、硼酸、blue-white(蓝色荧光) 4 3.14 GFP-tubulin转基因拟南芥植株的无菌培养 4 琼脂、MS培养基、培养皿、转基因拟南芥种子 5 3.21 拟南芥叶片、根部微管tubulin-GFP的荧光定位 4 磷酸缓冲液、镊子、载玻片、盖玻片 6 3.28 DNA与RNA的化学显色反应 4 葱头、冰乙酸、乙醇、三氯乙酸、盐酸、碱性品红、NaAc、蒸馏水 8 4.11 离心技术分离叶绿体和细胞核 4 菠菜、离心管50ml、甘露醇、EDTA、Tris、巯基乙醇、牛血清白蛋白、蒸馏水 9 4.18 细胞骨架的光学显微观察 4 咪唑、KCl、MgCl、EGTA、DTT、TritonX-100、戊二醛、考马斯亮兰R250、葱头、蒸馏水 10 4.25 细胞凋亡小体的观察 4 葱头、蔗糖、MnSO4、Na2Mo4、H3BO3、CaCl2、甘露醇、蒸馏水，细胞色素C 12 5.9 血细胞的分化和不同类型血细胞的观察(开放探究实验) 4 市售抗凝绵羊血，载玻片、盖玻片、指管、显微镜 13 5.18 考试 经典基础实验： 质膜的通透性观察、细胞骨架的光学显微观察、DNA与RNA的化学显色反应 综合性实验：烟草悬浮细胞或花粉管的内吞作用及内膜系统的检测 离心技术分离叶绿体和细胞核 细胞凋亡小体的观察 开放实验：GFP-tubulin转基因拟南芥植株的无菌培养 拟南芥叶片、根部微管tubulin-GFP的荧光定位 探究：血细胞的分化和不同类型血细胞的观察 “以模块式教学由浅入深，倡导深化探究学习理念”为原则，实验课程整合为分层次、分模块有选择地进行。 基础性经典实验模块 综合性实验模块 开放型实验模块 探究性实验模块 总评成绩： 实验操作、结果与实验报告占50%；期末考试占：50% 实验报告: 网上提交 1) 原理； 2) 实验结果； 3) 讨论 (包括对得到的实验结果可能原因的分析； 对本实验设计及操作过程中的一些想法或改进的建议) 细胞膜的选择透性 实 验 目 的 1． 了解细胞膜的基本功能 2 ．了解质膜对几种小分子物质的选择透性及通过速度。 1 The greater the lipid solubility, the faster the penetration 2 The smaller molecules , the faster the penetration 3 The more uncharged molecules, the faster the penetration ?脂溶性越高通透性越大，水溶性越高通透性越小；非极性分子比极性容易透过; ?小分子比大分子容易透过; ?带电离子很难透过； 简单扩散的细胞通透性取决于： 分子极性、分子大小 红细胞对各种溶质的渗透性不同，有的可渗入，有的不能渗入； 渗入速度也不同； 如何记录？ ?溶血现象 溶血现象（hemolysis） ?此时光线较容易通过溶液，溶液由混浊变为清亮透明。 ?溶质透过细胞的速度不同，溶血时间不同，由此来测量各种物质通透性的差别。 能渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压，使水进入细胞，引起细胞吸水胀破；即红细胞膜破裂，血红蛋白从红细胞中溢出的现象称为溶血现象。 等渗 （isotonic or isosmotic）溶液 渗透压与血浆渗透压相等的称为等渗溶液（如0.85%NaCl溶液），高于或低于血浆渗透压的则相应地称为高渗溶液或低渗溶液。 低渗 等渗 将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中： ?等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形； ?渗透压递减的一系列溶液中，红细胞逐步胀大并双侧凸起，当体积增加30%时成为球形；体积增加45%～60%则细胞膜损伤而发生溶血，这时血红蛋白(hemoglobin)出细胞外，仅留下一个圆形细胞膜空壳－“ghost”。 ?正常人的红细胞一般在0.4