关于精子核DNA结构变化的研究(打印版).doc

关于精子核结构变化的研究 12，朱丽霞3，刘小红11* （1 中山大学生命科学学院，广东 广州 510006；2 广西扬翔地方猪工程技术中心，广西 贵港 537100；3 漳州师范学院生物科学与技术系，福建 漳州 363000） 摘要采精当天的DFI均值为1.77%，体外18 ℃下升全程DFI分布在 1.77 % ～ 9.83 % 之间VOL与DFI -d、精液细菌等级 BAC 与 DFI–显著相关（P 0.01）。DFI – 3d、、与 CON 均为显著负相关（P 0.05），说明高倍稀释对精子不利精液中菌团多，细菌运动活跃，其无氧代谢产物降低了精液的pH值附睾中精子的凋亡与坏死的情况比较少精中含有多种物质保护精子免受损伤的作用减弱 关键词：人工授精精液指标DNA；完整性凋亡 Assessment of sperm chromatin structure 1，2CHEN Qing Sen, 3 ZHU Li Xian, 1LIU Xiao Hong,1CHEN Yao Sheng* 1 College of Life Science, SUN YAT-SEN University, Guangzhou 510006 1 Guangxi Native Pig Engineering Research Cente, Guigang 537100 3Department of Biological Sciences Biotechnology, Zhanzhou Normal University, Zhanzhou 363000 3 College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642 Abstract: This study assessed the boar sperm DNA fragmentation to improve the objectivity of laboratory semen evaluation, and to explain more variation in fertility between boars than any single sperm quality trait. FCM were used to detect the storage and heat treated semen. The results were that: The DFI of fresh semen was 1.77 %, which could infer that the apoptosis in the healthy boars epididymis was very low. During the 7 day culture with Modena in 18 centigrade, DFI waved high at 9.83 % and then turned down to 2.5 %. It informed that the sperm nuclear stucture was highly relate with sperm apoptosis, necrosis, and DNA fragmentation. Keywords: AI; Semen parameter; DNA fragmentation; Apoptosis 人工授精安全、高效传播优良基因的，研究与应用多停留在对公猪睾丸尺寸、精液量、精子活力、精子外部形态、精子浓度等方面的分析，这些都是一类补性性状，即精子活力或形态不足的时候，能通过加大每次输精的精子数来弥补［1］而对精子内部结构，如染色体成熟度、DNA 完整性等方面则鲜有报道，这些性状在常规检测中无法测定［］，在猪的人工授精中对精子 DNA 完整性研究更是少有造成连续性的生产损失［］。本研究通过流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）来检测猪鲜精加工后精子细胞周期染色体、线粒体、质膜等结构的完整性的变化，计算精子核 DNA 断裂指数（DNA Fragmentation Index，DFI），为猪鲜精技术的研究与生产应用提供技术与理论依据。 1.1 公猪群体及其饲养管理 数据来源有代表性的公猪群，6～7 月龄起进行采精训练，此时体重达 140g 以上。采用 2.1 m × 3.6 m 单栏饲养，日粮组成以玉米、豆粕、麸皮和鱼粉为主，营养水平：CP 17 %，ME 3.2 M Cal/g，Lys 1.2 %，Met 0.8 %；日饲喂量 2.8～3