生物转化生成D阿洛酮糖的类球红细菌的筛选.pdfVIP

生物转化生成伊阿洛酮糖的类球红细菌的筛选’ 张龙涛，沐万孟，江 波，张 涛 (江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡，214122) 摘要对鱼塘淤泥、水样中富集分离的27株光合细菌的静止细胞反应产物，采用高效液相色谱进行分析，从 中筛选到1株D阿洛酮搪产率较高的菌株，在形态和常规生理生化方面鉴定的基础上，结合16SrDNA序列分 析鉴定为类球红细菌(Rhodobacter g／L，pH 7．5)为底物进行静止细胞转化，45℃，5h，D-阿洛酮糖产率达到6．54％。 关键词D阿洛酮糖，Rhodobactersphaeroides，生物转化 D阿洛酮糖(D-psicose)是D果糖(D-fructose)种细菌被发现具有生物转化D果糖生成D一阿洛酮 C-3的差向异构体(见图1)，是在自然界存在极少的糖的功能，国内未见相关研究报道。 稀有糖之一[1]，其独特的生理功能引起功能食品研发 类球红细菌含有可能表达口塔格糖3一差向异构 者的极大兴趣。它可抑制肝脏脂肪合成酶活性；其甜 酶类似蛋白的基因[1引，实验尝试通过筛选可产D阿 味类似于蔗糖，甜度与D果糖相当，而热量值只有 洛酮糖的类球红细菌，为更进一步研究生物转化法制 0．007 备D阿洛酮糖提供新材料，开拓新途径。 kcal／g，可以当作甜味剂在减肥食品中使用； 在消化道内几乎不被吸收；口服D阿洛酮糖可抑制 ’oH 厂伽 肠道口一葡萄糖苷酶活性，防止或减少食用蔗糖和麦 --O D--tagatose3-epimernseI=o 1 LoH 芽糖后升糖反应的发生等[2~5]。作为一种新型的功 卜oH．．■·I◆ LoH I-oH L-oH 能性配料，D阿洛酮糖的研发前景十分广阔。 L一0H LoH 在对D阿洛酮糖进行功能研究之前，已有化学 ／2-果糖 D-阿洛酮糖 家对其化学法制备进行了探索Ee～8]，然而由于产物纯 图1 D-果糖和工)-阿洛酮糖 化步骤繁复，化学污染严重和副产物杂多等原因，没 有取得实质性的进展。生物法制备因具有反应单一， 1 材料与方法 纯化步骤简单等优点而逐渐成为研究的主要方向，迄 1．1材料 今已有十余年的历程，以D果糖为底物酶法制备胁 1．1．1 淤泥样品采集 阿洛酮糖因反应简单、底物易得而成为重点[9’10](图 ci— 1)。Izumori等从菊芋假单胞菌(Pseudomonas 建各地的淡水养殖基地。 chorii)中分离纯化得到D塔格糖3一差向异构酶(D 1．1．2培养基 tagatose3-epimerase，EC5．3．1．一)[111，用重组表达的 富集及分离培养基(g／L)：乙酸钠1．0，苹果酸 酶固定化制成的生物反应器以60％(w／v)的果糖为