芯片实验室在细胞研究中的应用进展.pdfVIP

·470· 虫堡生物医堂王捏塞盍2QQ8生12旦筮!垒鲞箜§期￡丛nJ旦i!塑鱼EⅡg：旦￡￡￡坐b丛2蚀8，y!!：!生，盟!!鱼 ·综述· 芯片实验室在细胞研究中的应用进展 陈斌周小棉 total 微流控芯片或称微全分析系统(miniaturized 尺度(纳米级【6J至百微米级)且相对封闭的二维或三维网络 analysissystem，斗一TAS)、芯片实验室一般是指把生物和化学结构，实现各种功能单元如微泵、微阀和微反应器等在局部 等领域中所涉及的样品制备、生物与化学反应、分离检测等 区域的集成，逐步具有更加全面复杂的功能。这些特征结合 基本操作单位集成或基本集成在一块几平方厘米的芯片上， 芯片材料选择的灵活性，原则上为细胞培养提供一个有利的 用以完成不同的生物或化学反应过程(包括细胞培养)，并对 技术平台。 其产物进行分析的一种技术…。仙一TAS实验室是微纳米技 目前芯片实验室多采用灌洗式培养方法：它将细胞悬液 术的重要组成部分，也是系统生物学研究的主要技术平台之 注入微通道或者微培养室，待细胞贴壁后，将培养液连续灌 一，有重大应用前景。近期研究工作显示，芯片实验室正成 入培养区域，实现营养物质的连续更新。芯片材料多采用聚 为细胞生物学研究的一个有力的技术平台。它能够实现多 种单元操作技术在整体可控的微小平台上灵活组合、规模集 良好的生物兼容性，对气体有一定的通透性，有利于细胞培 成，已经成为一种最具有发展潜力的细胞研究平台怛J。与传 养过程中0z和COz气体的交换。 统的宏观研究体系相比，微流控芯片在细胞研究方面具有多 Leclerc等【7J研制一种具有各种立体微结构的细胞培养 方面优势。例如，微流控芯片具有与体内微血管尺寸相近的 室，通过外接微泵系统，将培养液注入微芯片培养室，保证营 微通道且采用灌流培养方式，更接近于体内微环境；可以将 养物质的连续更新，并完成必要的气体交换过程。以此系统 诸多细胞研究操作步骤集成从而简化操作；便于在微小尺寸 d培养。最近 为平台可实现人肝癌细胞株HepG2连续10 下实现高通量，同时显著地节省时间和试剂【3，4I。微流控芯 Nevill等…8改善了芯片实验室细胞培养系统，减少细胞培养 片在细胞培养，特别是对细胞生长过程中形态与功能等方面 前需加人多种试剂和进行复杂的人工操作，研制出一种自动 的研究表现出独特的优势引5。因此，利用芯片实验室研究细 的芯片实验室细胞培养系统，对人宫颈癌细胞株HeLa、人乳 胞的速度正在加快，应用范围大大扩展。本文就芯片实验室 腺癌细胞株MCF一7、人淋巴细胞株瘤Jurkat细胞株及仓鼠卵 在细胞研究方面所采用的单元技术和基础应用方面的研究 巢细胞亚株CHO—K1等成功地进行了5d的培养。 最新进展作一综述。 芯片实验室进行细胞培养时，流体剪切力是影响细胞生 一、用于细胞研究的芯片实验室单元技术 长的重要因素，应在芯片的设计工程中予以关注，以最大程 1．细胞培养技术：细胞培养是生物学研究的基本操作单 度地减少流体剪切力对细胞状态的影响。如Lee等引9模拟 元，它是通过一个能模拟体内环境的体外空间，配置以无菌、 体内环境，设计了一种高通量微流控细胞培养芯片，可在很 适当温度、酸碱度和一定营养条件培养细胞，使之生长繁殖 大程度上减轻剪切力对细胞的影响。 并维持其结构和功能。现阶段多采用瓶皿或微孔培养形 2．细胞分选技术：细胞分选是从大量非均一细胞群体中 式。虽然与细胞相关的各种检测技术发展迅速，使得人们可 获得性质均一的目标细胞的一种技术【10J，常用于细胞生物