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HPLC谱图异常问题与原因及解决方法 百度搜索 互联网 首页 水质标准 水质检测 水质论文 国外水质 水质法规 认证认可 水质论坛 技术培训 资料下载 网站123 环境保护 卫生监督 水司传真 首页》技术培训 联系电话：024 传真：024 HPLC谱图异常问题与原因及解决方法 来源:互联网收集     液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程 序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 a、峰拖尾    原 因            解决方法 1、筛板阻塞    1.a、反冲色谱柱  b、更换进口筛板  c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷    2.填充色谱柱 3、干扰峰            3.a、使用更长的色谱柱  b、改变流动相或更换色谱柱 4、流动相PH选择错误    4.调整PH值。对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰 5、样品与填料表面的溶化点发生反应  5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱 b、峰前延       原 因                  解决方法 1、柱温低                     1、升高柱温 2、样品溶剂选择不恰当           2、使用流动相作为样品溶剂 3、样品过载          3、降低样品含量 4、色谱柱损坏        4、见A1、A2 c、峰分叉 原 因               解决方法 1、保护柱或分析柱污染       1、取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可 能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。 2、样品溶剂不溶于流动相    2、改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。 d、峰变形 原 因                解决方法 1、样品过载    1、减少样品载量 e、早出的峰变形 原 因                   解决方法 1、样品溶剂选择不恰当     1、a、减少进样体积  b、运用低极性样品溶剂 f、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰 原 因         解决方法 1、柱外效应    1、a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）  b、使用小体积的流通池 g、K’增加时，脱尾更严重 原 因                  解决方法 1、二级保留效应，反相模式    1、a、加入三乙胺（或碱性样品）  b、加入乙酸（或酸性样品）  c、加入盐或缓冲剂（或离子化样 品）  d、更换一支柱子 2、二级保留效应，正相模式    2、a、加入三乙胺（或碱性样品）  b、加入乙酸（或酸性样品）  c、加入水（或多官能团化合物）  d、 试用另一种方法 3、二级保留效应，离子对    3、加入三乙胺（或碱性样品） h、酸性或碱性化合物的峰拖尾 原 因                解决方法 1、缓冲不合适    1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液  b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液 i、额外的峰 原 因               解决方法 1、样品中有其他组份      1、正常 2、前一次进样的洗脱峰     2、a、增加运行时间或梯度斜率  b、提高流速 3、空位或鬼峰     3、a、检查流动相是否纯净  b、使用流动相作为样品溶剂  c、减少进样体积 j、保留时间波动 HPLC谱图异常问题与原因及解决方法 原 因              解决方法 1、温控不当    1、调好柱温 2