适用于高密度发酵产聚羟基烷酸重组大肠杆菌构建.pdfVIP

摘 要 聚羟基烷酸脂(VHA)是一类生物可降解塑料，具有许多优良特性和很好的应用前景，近年来 在医学领域和材料工程中发展很快。目前，PHA的生产主要是微生物发酵法，研究方向主要围绕 新型PHA的台成、PHA生产成本的降低等方面。本实验研究的是聚羟基丁酸(PHD)。 为了提高PHB产量，降低生产成本，本室利用透明颤菌jfn红蛋白(vhb)与氧结合的能力构建 能在高密度发酵过程中维持高溶氧的产PHBj程菌株，将编码VHb蛋白的基因在质粒上高拷贝 表达和整合到染色体上(低拷贝表达)都没有达到预期效果，本实验构建VHb蛋白重组表达载体， 将vhb结构基因置于tac启动子后，使vHb蛋白在IPTG的诱导表达下，构建Ecoil 当在23 coli h加入诱导剂时，E coli 到78．4％，而对照苗株E 达到21．6，PHB含量达到70．8％。在5L发酵罐中培养时，在对数生长后期诱导VHb蛋白表达， coli 最终工程菌菌体密度OD600达到96．4，PHB含量达到了50．2％；E 诱导剂的情况下苗体密度OD600达到