文蛤弧菌病的病原生物学的研究及组织病理观察.pdfVIP

摘要 对江苏吕泗发病文蛤的组织病理学进行了初步研究，结果发现病蛤的外套 膜、鳃、足和闭壳肌等组织都发生了不同程度的组织病理学变化，并随着病程的 发展逐渐严重，主要表现为外套膜、鳃、足和闭壳肌等上皮细胞肿胀、破裂或脱 落，结缔组织增生或溶解，血淋巴细胞增多，肌纤维结构松散、断裂，组织中嗜 碱性细胞增多，鳃组织发生坏死崩解。 从江苏吕泗文蛤养殖区发病文蛤和养殖水体中分离N5株菌株(病蛤中分离 N3株，养殖水体中分离N2株)。人工感染实验结果显示，菌株WGl702能引起 供试文蛤发病，死亡率为100％，且发病症状与原发病症状相同，提示该菌株是 引起文蛤大面积死亡的主要致病茵。对其形态、生理生化特征、分类地位及致病 性进行了初步研究，菌株WGl702直杆状，革兰氏染色阴性，菌落不透明，边缘 平整，黄色，生长48d,时后变为绿色，无臭味，生理生化指标为赖氨酸脱羧酶、 鸟氨酸脱羧酶、硝酸盐还原、甘露糖、氧化酶、甲基红阳性，精氨酸脱羧酶、精 s 氨酸双水解酶、水杨素、V．P阴性。为进一步鉴定该菌株，进行了16rRNA分子 S 鉴定，PCR扩增获得了大小约1．5kb的16rRNA部分片段，对其序列进行了测定， 并进行同源性分析和系统进化树构建。结果表明，该菌株与哈氏弧菌(DQl46937) 同源性最高，为97．4％，结合形态及生理生化结果，确定菌株WGl702为哈氏弧 菌(VibrioharveyO。 药敏试验结果表明，菌株WGl702对阿米卡星、复方新诺明、卡那霉素、 菌必治、先锋必、链霉素、庆大霉素、新霉素、头孢拉定9种药物高度敏感，对 氟哌酸、利福平、头孢噻吩、头孢氨苄、氨苄青霉素5种药物中度敏感，对四环 素、青霉素G低度敏感。 h时达到生 菌株WGl702的培养条件优化实验结果表明，菌株WGl702培养32 mL 长最高峰，最佳温度为28℃，最佳pH为7．0，最佳盐度为40，最佳装液量为60 ／150 菌株WGl702最佳C源为葡萄糖、N源为蛋白胨。pH、温度、不同菌龄正交实验 7．1，温度28℃，菌龄24 证明最佳组合为pH h，方差分析结果显示三因素中pH对 生长影响最显著(PO．05)，各因素对菌体生长的影响程度为pH菌龄温度。 SrRNA，哈氏弧茵，条件优化，组织病理 关键词：文蛤，菌株WGl702，16 U Abstract researchWaS ，。Apreliminaryhistologicalpathology conductedforclamswith diseaSeinLvsiharborof resultsshowedthat Province，The Jiangsu gills，mantles，foot andadductormusclehadbeen in of injuredvaryingdegreespathological changes，As course the was thediseaSe damage developed being