恶性疟裂殖子表面蛋白1合成基因在毕赤酵母中表达.pdfVIP

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2015-08-12 发布于安徽
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恶性疟裂殖子表面蛋白1合成基因在毕赤酵母中表达.pdf

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卷期生物工程学报 ! %’(!)( 年月 #$$$ !! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( )*+,-+. #$$$ - 12 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 恶性疟裂殖子表面蛋白合成基因在毕赤酵母中的表达 ! # ! # 张冬梅潘卫庆陆德如 ! # （第二军医大学病原生物学教研室；医学生物技术和分子遗传研究所上海） #$$144 摘要恶性疟原虫裂殖子表面蛋白是当今疟疾疫苗主要的候选抗原。由于天然基因含量异常高 ! 345! 95 （为），使得克隆全长天然基因无法实现。本文已全合成了基因（），解决了该天然基因在异源系 21: 6! 1/1$- 7 ; 统中不稳定的问题。为制备大量重组蛋白进行疫苗有效性试验，本研究建立了基因在毕赤酵母中的 6! 6! 7 7 表达，将合成的基因克隆到毕赤酵母胞内表达载体，构建了重组质粒／，用电击转化毕 6! 8=4? 8=4?,@! 7 ; ; ; 赤酵母得到重组转化子，经证实基因已整合于毕赤酵母染色体中。含有重组表达质粒的毕赤酵母菌经 =7 6! 7 甲醇诱导后表达出全长重组蛋白。表达产物能与识别分子二硫键依赖构象表位的特异性单抗发生 6! 345! 7 很强的反应，表明重组蛋白至少在该表位构象上与天然蛋白一致。从毕赤酵母中分离得到大量为开 6! 6! 7 7 展该蛋白的结构与功能，特别是测定其疟疾保护性免疫提供可能。关键词毕赤酵母，恶性疟原虫，疟疾疫苗，裂殖子表面蛋白! 中图分类号文献标识码文章编号（） A23 9 !$$$04$