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基因表达优化的 3 个关键步骤 亲和标签的选择 表达条件的优化 密码子优化 概述 基因表达优化的目的在于通过重组基因技术表达出尽可能接近天然构象的重组蛋白质。重组 蛋白表达的关键要素包括基因、载体、表达宿主、表达培养条件。这些要素之间是相互影响 的，所以为了更好地达到优化的目的，需要将目标放到其所在上下文中进行优化。密码子优 化作为一种相对成熟的生物信息手段，已经被广泛应用于重组蛋白表达过程中。同时融合标 签的选择，表达条件的优化对目标蛋白的表达量及表达质量也起到至关重要的作用。接下来 将对融合标签、表达条件、密码子优化参数进行介绍。 亲和标签的选择 亲和标签已经成为重组蛋白表达及纯化的一个重要且有效的工具。它们不仅有利于融合蛋白 的检测与纯化，而且可能对目标蛋白的理化性质产生有利的影响，可以提高重组蛋白的表达 水平，增强重组蛋白的可溶性，促进重组蛋白的正确折叠。像 GST、 MBP 、Ub、Sumo 可以明显提高重组蛋白的表达水平。在融合亲和标签进行原核表达的过程中，某些高度可溶 的蛋白标签具有提高融合蛋白可溶性的能力，如 GST、MBP、Sumo、NusA 等，其中研究 最清楚的增强融合蛋白可溶性的标签有 Mbp 和 NusA。而可以促进蛋白正确折叠的标签有 MBP、 NusA 和 Trx 。亲和标签还可能抑制融合蛋白的水解、保护融合蛋白的