理肠饮对肠易激综合征大鼠内脏高敏性干预的实验的研究.pdfVIP

CRH通路是影响IBS发病的重要机制之一。且在临床上我们也常常可以看到，许多D—IBS患者在 经过中药康泰复方治疗后，腹痛、腹泻、抑郁不舒等症状较前有明显的改善。因此我们猜测：1) 这可能是与中药康泰复方降低CRH—R1的表达，阻断CRH通路，减缓了结肠活动、截断肠道神经 与中枢神经的联系相关。2)在“心胃相关”理论指导下治疗IBS的中药康泰复方可能通过阻断CRH 通路达到治疗IBS的作用，说明“心胃相关”理论的其中一个作用靶点是肠黏膜CRH—R1，试图证 明“心胃相关”理论的其中一个西医作用机制可能是CRH通路，但是其是否主要的作用途径及是 否存在其他作用途径尚待进一步研究探讨。 理肠饮对肠易激综合征大鼠内脏高敏性干预的实验研究 孙大娟1 程晓云2 吕隆杰2 迟莉丽1 续海啸2 刘秀梅2-t-B明2 1 山东中医药大学附属医院 2 山东中医药大学2012届硕士研究生 我们在几十年临床经验的基础上，总结出中药复方理肠饮治疗IBS，临床取得了满意疗效。在 前期临床研究的基础上，进一步采用动物实验的方法，观察其对IBS大鼠血清及结肠组织中5一m’、 SP、CGRP含量的影响，以期探讨理肠饮治疗IBS的深层机制。 1材料与仪器 1．1实验动物新生SD大鼠120只，SPF级，雌雄各半，体重约11±29，购自山东中医药大 10301。 学实验动物中心，动物合格证号：201 1．2药品、试剂及仪器理肠饮(炒白术、山药、云苓、白芍、柴胡、陈皮、枳壳、香附、合 欢皮、防风、甘草)水煎剂，按每天成人用药等效量的lO倍、3倍、1倍(即19．2g·kg-1·d～、 5．76 g·kg～·d一、1．92g·kg～·d-1)给药；匹维溴铵片(得舒特)：用法：碾碎后溶于生理盐水配 ELISA试剂盒、SP、CGRP放 苯胺兰、苏木精、石蜡油均由山东中医药大学实验中心提供；5一HT 免试剂盒购自厦门慧嘉生物科技有限公司。中心静脉导管(直径lmm)、胶乳导尿管(导管直径2mm， 自动脱水机、生物组织包埋机、电热恒温水温箱、Olympus—BX60冷光源双目显微镜、来卡石蜡切 片机(德国)、BIO—PAD 药大学实验室及山东省中医院实验中心提供)。 2实验方法 得舒特组饵组，n=20)。 2．2造模方法采用醋酸结肠慢性刺激法造成肠道高敏性的IBS大鼠模型。A组大鼠从出生第 11天到第24天的两周内，每天直肠内给予O．9％生理盐水o．5ml，每天1次，作为对照。其余各组 大鼠从出生后第11天开始，到第24天，每天直肠内给予0．5％的醋酸0．5mL，每天1次。造模结 束后(即从出生后第25天开始)的两周内，不进行任何操作。大鼠出生后第38天进行一次肠道敏 感性检测以评价造模是否成功。 2．2给药方法自造模成功之日起，灌胃给药。A组、B组均以生理盐水灌胃；C组以1．92 g·kg-1·d。1理肠饮灌胃；E组以19．29·k旷1·d-a理肠饮灌胃； g·kg～·d-I理肠饮灌胃；D组以5．76 ·464· F组以15mg·kg～·d-I得舒特灌胃。每天1次，连续14天。 2．3标本采集用药结束后，大鼠禁食12h，用10％水合氯醛麻醉后，下腔静脉取血，分别取 HAClml略做碾 死，取距肛门8era内的结、直肠段，取出活组织，吸去血迹，称重，尽快放入1N 定5-HT含量。反应结束后，在30min内于波长450nm的酶标仪上读取各孑L4值。以4值为纵坐 标，标准品的浓度为横坐标，绘制曲线图，根据样品的A值查找对应的浓度。用RIA测定SP、CGRP 含量。严格按照SP、CGRP放免试剂盒操作说明书进行，仪器使用GC一1500^y放射免疫计算器。 2．5组织病理学改变用4％多聚甲醛固定的结肠组织石蜡包埋，4ttm连续切片，HE染色， 观察组织病理学改变。 3结果 3．1理肠饮对大鼠血清、结肠组织中5-HT含量的影响 结果如表1所示，与A组相比，B组大鼠血清及结肠组织5-HT含量明显升高，差异有统计学 意义(P0．01)；C