RecQ解旋酶分子特性的的研究.pdf

IN SUMMARY CHINESE(中文摘要) 它作用于DNA以一条链为模板聚合形成一条新的DNA链；而且也让科学家们寻找 到一种酶能够在DNA复制时破坏互补碱基对的氢键结构而打开DNA双螺旋结构。 随后，相似功能的酶在RNA复制中也被发现。这类酶被科学家称为解旋酶i解旋酶 是一类能解开核苷酸双链的酶，它广泛存在于从病毒到人类等多种生物体中。自 Coli 1976年人类在大肠杆菌(Esherichia E．coli)中发现了第一个解旋酶，至今已有 上百种解旋酶被发现，而且这一酶家族成员还在不断扩大。 解旋酶广泛存在于多种生物体中，有些生物还同时具有多种不同类型的解旋 酶。尽管解旋酶种类繁多，人们在研究过程中发现，这类蛋白酶在其氨基酸序列上 有一定的同源性和相似性。分析表明，这些同源序列在进化过程中构成了几个高度 保守的区域，这些区域执行不同的酶功能。人们根据酶的二维结构和一级序列，把 解旋酶分为几大家族来分类研究。经过多年的研究，人们发现解旋酶具有多种功 能，在细胞内它们参与DNA复制、修复、转录重组以及RNA接拼、核糖体组装、 蛋白质翻译，端粒稳定。最近，还发现个别解旋酶甚至参与机体天然免疫反应机 制。解旋酶已不仅仅只是分开核酸双链结构的一类酶，它的生物功能远不止此。 解旋酶第二大家族中的RecQ解旋酶亚家族在核酸代谢过程中起了关键的作 用，这一家族参与DNA复制、DNA修复、重组、转录甚至端粒稳定机制。人们发 成员。其中，BLM、WRN、RECQ4编码基因缺陷会导致人类相应的疾病发生，它们 是极其罕见的隐形遗传疾病，但是在分子水平都表现为基因组高度不稳定性、染色 体异常(染色体断裂、缺失、重排、姐妹染色体交换等)和对DNA损伤因子敏感性 增加。在临床上表现为过早衰老、Ⅱ型糖尿病、骨质疏松、动脉硬化和极度容易发生 癌症。大部分病人都是最终发生不同癌症而死亡。这一临床共同现象引起了人们的 关注和研究热潮。对解旋酶的结构功能、作用机制的研究不仅可以认清核酸代谢过 7 程，还能帮助我们揭示癌症发病的某些相关机理。同时了解病毒解旋酶的结构与功 能，为抗病毒药物的研制提供了新的靶点和思路。 解旋酶具有四大基本生物化学活性：NTP水解活性、DNA或RNA结合活性、 核酸链解链活性和核酸链退火配对活性。在二价金属离子(比如M矿)和NTP的存 在下，解旋酶便表现出水解NTP的性质，大部分酶水解√m和dATP，一些酶则能 水解其他的核苷酸，比如1]曙和G，冲。当解旋酶与DNA或RNA结合后，利用水解 核苷酸产生的能量，推动酶在核酸链上的移动，从而解开互补的两条核酸链。随着 研究的深入，人们发现有些解旋酶在核酸修复过程中能促使核酸链配对重组。这使 得我们意识到解旋酶在基因稳定过程中的作用越来越重要。但是并不是所有的解旋 酶成员都表现出这四种基本生化功能，这与酶自身的结构有密切的关系，酶的结构 决定了它所能表现的作用机制和生化活性。长期以来，科学家们一直研究探索解旋 酶的结构与其功能间的相互关系，力求发现解旋酶本质的运作机制。 RecQ解旋酶家族尽管蛋白种类繁多，在氨基酸序列上同源性不高，但有限的同 源序列构成了数个典型的功能区域：’从N端向C端方向，分别为位于氨基酸序列中 D保守区域 间段的解旋酶核心区域，RecQC端区域(ReeQ．Ct)和解旋酶RNase (}丑mC)，这些区域具有不同的功能，并相互协调共同执行解旋酶的运作机制。 解旋酶核心区域是解旋酶标志性结构，它由一段高度保守的氨基酸序列组成，含有7 个保守区域， 家族唯一含有的结构特征，但不是所有RecQ成员都含有这一结构域。RecQ—Ct区域 包含两个重要的亚结构域：由四个a螺旋和四个保守的半胱氨酸残基组成的结构平 台，因能特异结合锌离子而被命名为锌结合区域或锌指结构(zinc-bindingmotif,zinc 现RecQ。Ct结构域主要负责酶与核酸的结合、酶自身的折叠作用。HRDC区域位于 解旋酶氨基酸序列的C端，在部分RecQ成员中缺失，对这一结构域的认识甚浅，一 些研究表明HRDC区域能够增强解旋酶对N