几种乳酸菌的分离与筛选_陈建华.pdfVIP

科技信息 高校理科研究 几种乳酸菌的分离与筛选 吉首大学张家界校区城乡资源与规划学院 陈建华 朱望银 杜亚填 ［摘 要］本文通过选用较为简单的培养基和较为简单的实验流程，从自然发酵泡菜杂居混生的微生物中,分离筛选出具有优良发酵 特性的乳酸菌菌种。根据各类微生物的形态结构和新陈代谢类型,利用合适的分离培养基和鉴别性培养基,结合显微镜镜检、菌落特 征以及相关生化特性进行鉴定筛选。为发掘新的乳酸菌种或新菌种的增殖培养基的研制与改良提供些许参考。 ［关键词］乳酸菌 分离 筛选 乳酸菌是发酵食品中应用最为广泛的细菌之一。基于其特殊的生 FeSO ·7H O、柠檬酸二铵、K HPO 、MnSO ·4H O 3%- 5% （体积分数）过氧 4 2 2 4 4 2 理功能，在发酵工程中,首先要选育优良菌种,但由于微生物在自然条件 化氢。 下都是杂居混生的,因此要选育良种,就必须对其中的纯种微生物进行 含氨硝酸银溶液：甲液：0.1mol/L 硝酸银水溶液；乙液：5moL/L 氨水 [1] [3] 分离或鉴定 。根据各类微生物的形态结构和新陈代谢类型,利用合适 溶液。临用前两液以1:5 混合。革兰氏染色液 ： 的分离培养基和鉴别性培养基,结合显微镜镜检、菌落特征以及相关生 草酸铵结晶紫染液（100ml）：A 液：结晶紫2g，95% 乙醇20ml ；B 液： 化特性,可以把混杂在一起的微生物分离或鉴定出来。本课题旨在通过 草酸铵0.8g 蒸馏水80 ml （将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解， 选用较为简单的培养基和较为简单的实验流程，从自然发酵泡菜中分 配成A 液，将草酸铵溶于蒸馏水，配成B 液，两液混合即成）。 离筛选出具有优良发酵特性的乳酸菌菌种。为相关乳酸菌种或新菌种 卢戈尔碘液：碘化钾2g，碘片1g，蒸馏水300ml （先将碘化钾溶于少 的增殖培养基的研制与改良提供些许参考。 量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，待碘完全溶解后加足蒸馏水即 1.材料与方法 可）。 1.1 实验材料 脱色剂（100ml）：95% 乙醇。 1.1.1 样品来源 番红染色液：番红（Safranin O）2.5g，95% 乙醇100ml。取上述配好的 实验室自制酸菜：大白菜、青菜。市售酸菜：雪菜、酸豆角。 番红酒精溶液10ml 与80ml 蒸馏水混匀即可。 雪菜、豇豆、大白菜、青菜4 种泡菜均为湘西土家族集居区民间传 盐溶液的配制：将无水CaCl (0.2g) 和MgSO ·7H O(0.48g) 混合溶解