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大鼠肾细胞分离制备及培养方法的比较.pdf

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大鼠肾细胞分离制备及培养方法的比较.pdf

第 34 卷  第 5 期 卫  生  研  究 Vol. 34  No. 5 574  2005 年  9 月 JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH Sep.  2005   ( ) 文章编号 2005 ·论著· 大鼠肾细胞分离制备及培养方法的比较 顾光  高   支媛  殷召雪  隋海霞  刘珊  周宇红  徐海滨1 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所,北京 100021 ( ) 摘要 : 目的  比较胶原酶消化法、胰蛋白酶消化法和胶原酶、胰蛋白酶两步消化法 简称两步消化法 对 ( ) ( ) 大鼠肾细胞分离效果及细胞产量的影响 , 以及不同培养基 MEM 、RPMI1640 、鼠龄 乳鼠、成年鼠 对细胞产 ( ) ( ) 量、质量、增殖率和乳酸脱氢酶 LDH 漏出量的影响。方法  分别对两组 Wistar 大鼠 乳鼠和成年鼠 用三种 不同的消化方法制备大鼠肾组织细胞悬液 ,分别在 MEM 培养液和 RPMI1640 培养液中原代培养 ,培养 48 小 时之后第一次传代 ,观察细胞质量 ,计算细胞产量 ,MTT 法检测传代细胞 24~48 小时之间的增殖率 ,生化分 析仪检测传代细胞第 1~7 天培养液中LDH 漏出量。结果  胶原酶消化法和两步消化法的肾细胞产量显著 ( ) 高于胰蛋白酶消化法 P 001 ,两步消化法的细胞质量优于胶原酶消化法 ,MEM 培养液和 RPMI1640 培养 ( 液对细胞产量、增殖率和 LDH 漏出量的影响均无显著性差异 ,乳鼠的肾细胞产量显著高于成年鼠 P 001) 。结论  两步消化法对于肾细胞的分离制备尤为适合 ,MEM 培养液和 RPMI1640 培养液均适于肾细胞 的培养 ,乳鼠比成年鼠更适合肾细胞的制备。 关键词 :肾细胞  大鼠  细胞培养  原代培养  毒性筛选 中图分类号:Q593  Q5569       文献标识码 :A Comparison of isolation , preparation and culture methods of rat kidney cells Gu Guang , Ga

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