微生物培养标准作业程序.doc

微生物培養標準作業程序 強場物理與超快技術實驗室 製作 製作人：開啟生物操作櫃風機紫外光燈管電源，殺菌10－15分鐘。 手用洗手乳洗淨，擦乾後戴上手套。sample：大腸桿菌〈Escherichia coli〉wild type medium：LB (tryptone broth) bacto-tryptone 1% NaCl 0.5% yeast extract 0.5% redistill water 98% autoclaved glycerol 標準作業程序： 培養 準備試管、酒精燈、大腸桿菌與medium，可多準備一張沾有70%酒精的擦手紙方便隨時清潔用。 開啟medium前，先用火烤瓶口以殺菌。 吸取3 ml medium。 取空試管，開啟前先燒烤瓶口以殺菌，將medium注入空試管中。 用最小的pipet吸一點細菌〈有吸到即可〉。 將細菌注入裝有medium的試管中，傾斜試管以讓medium接觸到pipet。 斜放至有震動功能的生物培養箱，小心試管底部不要接觸到培養箱底部，避免摩擦。震動的目的是增加與空氣接觸的面積，所以瓶口不可轉太緊，使空氣可以跑進去。 生物培養箱的溫度設定37.0度C，震動速度設定260 RPM。 微生物大約是15分鐘會複製一次，經過15~20個小時後生長的情況會最好，將試管取出，此使內部應該長滿微生物並且呈混濁狀。 保存 準備autoclave