chapterHomologousrecombinationatthemolecularlevelSiteSpecificRecombinationofDNA.ppt

若玉米带有野生型C基因，则胚乳呈紫色； C基因的突变阻断了紫色素的合成，那么胚乳呈白色; 在胚乳发育的过程中，突变发生回复导致斑点的产生,回复突变发生在早期发育阶段，紫斑就比较大; McClintock推测原来的C突变（无色素）是由一个“可移动的控制因子”引起的，称解离因子(dissociator，Ds)，它可以插入到C基因中（即转座）。 另一个可移动的控制因子是激活因子(activator，Ac)，它的存在可激活Ds转座，进入C基因或其他基因，也能使Ds从基因中转出，使突变基因产生“回复突变”，这就是Ac-Ds系统 9.3.3 玉米 Ac-Ds系统 图6-21 Ac和Ds的结构比较 玉米的Ac ~ Ds系统 图6-22 玉米的Ac-Ds系统 DDE-转座酶：Asp(D)2,Glu (E) Y2-转座酶 ：2Tyr Y-转座酶:Tyr S-转座酶:Ser RT/En转座酶 图6-26 由DDE转座酶介导的转座子剪切和插入机制 图6-27 转座子的复制和插入机制 图6-28 逆转座子的转座机制 9.5 转座的遗传效应 ① 转座引起插入突变 ② 转座产生新的基因 ③ 转座产生的染色体畸变 ④ 转座引起的生物进化. A B C D E A B C D E A B C D E 转座子 A 原有DNA组织顺序 1 D基因插入转座子 2 D基因插入转座子缺失 3 转座子引起倒位突变 B 原有DNA组织顺序I 原有DNA组织顺序II 原有DNA组织顺序I 原有DNA组织顺序II A B D C E A B C D E a b c d e A B C d e a b c D E × 通过转座子介导的姐妹染色 单体间的染色体内异位交换 DNA-PKC 9.5 非常规重组(illegitimate recombination) 9.5.1非同源末端DNA的连接(nonhomologous end joining, NHEJ) Ku70 Ku80 Sir2/sir3/sir4 XRCC4/DNA 连接酶 DNA-PKC ↓ ↓ XRCC4/DNA 连接酶 1976年日本学者利根川获得1987年诺贝尔奖 免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig） L链C区：k，λ H链C区：ａΥδμε RAG1/2, HMG1/2 Ku/DNA-PKC/连接酶 H连 k，λ连都有两个等位基因簇,表现相斥 1先B细胞H重排,后L.2 B成熟细胞 9.5.1非同源末端连接(NHEJ)和人类抗体分子 Gellert构建信号序列(RSSs) * * * * 10 其他形式的重排 Department Life and science Topic 1: 位点特异重组 交换不紧密依赖同源性 DNA (what) 主要依赖底物和产物的拓扑学性质 (how) DNA分子之内→DNA切除修复 DNA分子之间→DNA分子整合 图6-10 缺失性位点特异性重组和倒位式位点特异性重组图解 1.1位点特异重组过程 λ噬菌体 int基因编码λ整合酶(integrase) 宿主整合因子(integration host factor,IHF) Xis蛋白 1.2λ噬菌体DNA 位点特异性重组最典型的列子是λ噬菌体对E.coli的整合。 att位点： 噬菌体λ的整合和切离是在特异位点即附着位点(attatchment sites, att ) 通过重组完成的，若这个位点发生突变就会失去功能而抑制整合： 细菌 att B (BOB’) 噬菌体 att P (POP’) “O” ，被称为核心（core）序列，为att B和att P共有的； 两侧序列B，B’和P，P’被称为臂（arms）； ? 图6-11 λ噬菌体的位点特异性整合 图6-12 λ噬菌体重组整合或切除时切点的序列 整合和切离的相关蛋白： 整合和切离这两个反应所依赖的蛋白不完全相同： 整合（att B ×att P）反应需要integrase,Int和宿主的整合因子（integration host factor,IHF）。 切离（att L × att R）反应需要噬菌体Xis基因的产物以及Int和IHF蛋白的参与。 整合和切离反应都需要Int和IHF；而Xis在控制方向上起到重要的作用，是切离所需要的，对整合起抑制作用。 图6-13 酪氨酸重组酶的作用机制 The tyrosine recombinase 9.1.3位点特异重组与染色