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RI显微操作系统操作方法 一、空中定位（设置针） 用两个4X物镜 1、拿一个空的皿，轻轻在上面 交叉线。 2、放置这个盘在显微镜载物台下，并移到中心。 3、选4X物镜（无座，或低4X物镜），聚焦交叉线在表面（在这“10个步骤”中不需再调显微镜聚焦钮！！）。 4、选4X物镜带座（或4X）。 5、全部升有黄/黑颜色杆，将针嵌入到左边HOLDER，再将它放入PAR21（左边）。 6、对中心，将控杆（红色）B、C放在中间位置。B在下面为X、Y、Z方向微调，C在上面为X、Y粗调；同时Z轴方向，即上、下方向的微调放在中间。 7、将针调进显微镜视野，可调HOLDER前进驱动钮“E”，和PAR21顶上粗调（升、降低钮）“F”。如必调“C”，调“B”。检查针是否一条线，可旋转HOLDER持针器上的“G”。 8、选择4X物镜（不带座），这时交叉线仍在被聚焦面。 9、全部降低（黄/黑）杆，将针进入视野，并稍微盘的表面，如果发针重复太，或太低可调整“H”。时保证针稍盘的表面，仅需调B（“B”——为X、Y、Z微调）。 10、重复上面步骤，调injecting针。 二、微针气路衡 （仅对injecting针进行，千万不对Holding针进行） 选一个干净、单独皿，不能有油覆盖在上面。 方法一： 1、放入一大滴PVP在盘的中心（不用油）。 2、旋转rotator顺时针，直到全部降下。 3、压下“E-button”钮。 4、用显微操纵仪降低针进入media/PVP介质滴里。 5、旋转SAS反时针（向上）大约75%（75mm）。 6、保持衡大约5分钟，PVP上升进入针的不可拉处。 7、压下“E-button”不放松，旋转SAS顺时针（向下）大约25mm。 8、举针换皿。 方法二： （本方法前四步同方法一，仅从第五步开始区别） 5、旋转SAS反时针（向上）大约4～5个圈。 6、保持衡对PVP三分钟，对培养液4分钟。如使用PVP，建议PVP浓度不太浓，最好7%或直接在培养液中进行衡。 7、压下“E-button”，并松手，等两分钟。 8、旋转SAS顺时针（向下）大约3～4圈，等三～四分钟，一般液自会到针的前端。 9、必时可顺时针或反时针调整，直到针前端为您需的液长度。 10、举针换皿。 注意： 1、用手动控roatator当injecting针内液开始移动时，手的动作这时慢。 2、重新装针，应先放气（注意安全，装针的方向不对着人）。 3、应用新针进行练习，直接从气路衡、动精子、吸、吹精子等操作连贯进行，这样容易找到感觉，上手快。这样看似浪费但比先用旧针动，再用新针或旧针进行气路衡、吸、吹精子效果好。 4、我们不建议用旧针练习，但如果用旧针练习，请一定注意不将针内油、液吸入气路管子内。 三、维 1、概述 （1）不使用时，如果定期使用防尘盖保仪器就没有必再进行维。 （2）必须迅速去除液或灰尘，也就是说保持仪器清洁。 2、电动仪器 （1）洒出的液：禁止弄湿电动仪器。如果水不小心洒在上面，在菜单上把电源闭，然后迅速擦干仪器。 （2）保险丝：必须用新的合适率的保险丝来替换损坏的保险丝。 3、显微操纵器 在仪器的安全轴承上面大量地使用润滑剂，此，没有必进行定期的维。由使用了轴承环，在每根控杆底部的球形轴承都不需润滑剂。然而，我们建议每六个月调紧固螺丝一次。 如果溶液被洒落在仪器上面，或者原始的润滑剂受到污染或者已经被清除掉，线性滑珠就需用优质的二硫化钼油脂（例如Rocol或类似的物质）来润滑。 四、故障处理 1、注射器内油达到了微吸液管的顶端了吗？（仅用充油系统系统） 更换微吸液管——油不能从顶部抽出——当往工具柄嵌入微吸液管的时候不允许油到达顶部。 2、系统里有污油？（仅用充油系统系统） 更换聚乙烯管道和矿物油。 3、你已经使你的注射微吸液管衡了吗？（仅用充气系统） 衡注射吸液管——使用SAS11/2-E空气注射器（注意：仅对INJECTING针进行，不对HOLDING针进行。选一个干净，单独皿，不能有油覆盖在上面；总行约100mm）。 （1）在有盖培养皿中间滴入一滴相当大的PVP。 （2）顺时针方向旋转SAS控器（也就是向下）。 （3）按旋转器上部的衡 。 （4）使用显微操纵控装置把微吸液管放到PVP液滴里。 （5）逆时针旋转SAS（向上）大约75%的位移 （6）放置5分钟左右使其衡，PVP应该把微吸液管提升到几乎达到微吸液管的不可拉柄处。 （7）顺时针旋转SAS时继续按动衡；在注射过中保留约25%的位移用调整。 4、故障：不能吸气/注射 解决：是微吸液管顶端堵塞了吗？ （1）如果你的装置带有SoS Sonic Sword，将微吸液管从样本取走，通过注射器的正压，从SoS施加脉冲，那么就可以把堵塞吸液管的污垢去掉。 （2）用新的微吸液管替换。 5、