Angioarrestin的克隆表达及其生物学作用机理的初步研究.pdf

A月P如n，7t，咖的克隆表达及其生物学作用根理的初步研究 通过抑制肿瘤相关的fffL管生成可以抑％《肿瘤的生长。AⅡgjoarreslin作为一种 主要的内源性血管生成抑制因子．其在抑制内皮细胞增殖、迁移，以及内皮细胞 管状结构形成等方面具有重要作用。本课题运用基因工程技术，蒋从人肝cDNA 文库中克隆的an百oarees曲基因进行表达、纯化并制备了相应的特异性抗 domajn的大细 ang．oarres伽抗体。在获得了稳定转染an西oarrestin及其。端FD 胞肺癌细胞株NcI．H460后，通过绘制细胞生长曲线发现转染细胞株与野生型及 转染空质粒的对照组细胞株相比，表现出…定的细脆生长缓慢特性。细胞粘附实 验和迁移实验中，转染FD细胞株还表现出细胞粘附能力增强，迁移率显著下降 的特点，预示ngioarrcstin不仅具有抗血管形成活性，很有可能还其有一定的抑 制肿瘤生长的活性。此外，通过灯PcR手段还对受Ⅱ盯。影响的内皮细胞中 an甜oarres血的表达调控进行了初步的探讨。 关键词：AIl譬joarresIin多克隆抗体内皮细胞增臻粘附迁移RT．PCR The Mech采晌m a伽jngEⅫ啪ssi啦壮d s|lldyofA孵f∞肿鳓 To in c姐inhibjtlheof proh．bn cancer caⅡ∞LAs a11百ogenesisprocess growlh oneof mle协 endogenous鞠tj躺垂ogenicfad0‘雠舀oarres雠plays明i唧oft卸t cndothclialceIls bloodvesselnctworkfo珊ation．Tnthe pron把ration，m蟾ratioⅡaIld for w勰clonedffombum强Evef presentthes{sⅡ坞encodiⅡggeⅡc an酹oafrost主n cDNA aPCR l慨甜yby m甜岫d；its MBP_t899ed aIld anflbodieswe|。ob衄ined puri蠡ed。珏s删yclonal to舶龇 throu曲{mmuniza畦0n mj∞anditstiterwas as ab咖11：1280 indjrectELISA卸dlhe dete眦inedby aIInbody wester丑blot。StaⅨe重mlls纯cledNcl，H460cclllinewi饿 speci丘积y啪sassess甜by als0 andFDwas established．1飞cccll 柚gioarrestin growth叫rvew镐es廿mated，and lhat thecelltransfcctcdwilhFD wjthlhe characIericsof domai“appears hi{；her adhesjOn aBdl