胃癌中DNA聚合酶β基因T889C突变的检测和表达.pdf

。 摘 要 目的分析DI恤聚合酶0(DNA邮)基因在人胃癌细胞系和组织中表达水平，初 步探讨DNApo堆基因与胃癌发生、发展的关系，为发现新的肿瘤标志物，进行早期胃癌 细胞系和107例胃癌组织及其配对正常粘膜中DNA po堆TB89C突变，分析该突变频率 及分布规律。(2)构建原核表达载体，表达DNA po堆髑89c的纯合突变体及野生体，比 较其生物学功能的异同。(3)应用半定量RT—P(、R，检测12个细胞系及大蒜素作用后 系中，来源为中国汉族人的四个胃癌细胞系，均为DNA删口T889C突变阳性，而其余8 率为9，3％，配对正常粘膜组织突变阴性。该突变引起其编码的259位氨基酸由亮氨酸 变为丝氨酸，导致其二级结构发生改变。(2)成功构建原核表达载体，并大量表达DNA po}p髓89c突变蛋白。(3)DNA 表达水平变化趋于一致。结论DI姐呵p 胃癌的突变热点之一，并且此突变可能影响DNA叫p蛋白的损伤修复功能，增加对胃癌 的易感性。DNA阿B、Recql5两个复制相关基因具有协同关系。 关键词DNA polp；突变；胃癌； o Abstract 』!山u 1’o the be抑eenthe level0fDNA investigate expression p01gene relationship p 0f andRFLPwas h眦aIl canoer．ME]田oDS(1)SSCP and咖rigenesbgaStric per- fomledto tlle 0fmutationabout【)NAT889Cin12 cancerceu detectfrequency polp gaStdc linesarld120 0fhuman canoer pairS g勰tric tiSsues．(2)Establish．mgp溅ar)忧icexpression vectorS wild and舢taIlt mRNA stablye)cpresstype typeD小她polpgene．The expressbn 、耵asdeterrrlifledRT—P(、Ra11dthe level Westemb10t． using was绷yeduSing p01pprotein the levd。f in12 oel¨ine谢thRT—PCR． e)(preSSion gaStric (3)CcImpared po堆and脓q15 in40f12。elllinesandin100f 1tESIⅡ月瞎 rnutationofT889C、张sdetected (1)Thepoint 107tissue DT呵A