重稀碱金属Rb-%27%2b-%2fCs-%27%2b-与人红细胞的相互作用及其跨膜途径的研究.pdf

重稀碱金属Rb+／Cs+与人红细胞的相互作用及其跨膜途径的研究 卢靖 摘要重稀碱金属铷、铯广泛存在于自然界，我国亦有丰富的铷铯资源。文献 表明铷铯在人体内含量的失衡与心血管疾病、老年痴呆、肿瘤等病症关系密切， 并在很多方面有模拟钾的生理功能，常常与钾产生相互竞争机制。但目前在细胞 和分子水平上对铷铯宏观生理效应的化学基础研究还很缺乏，因此探讨铷／铯进入 细胞的方式及它们对细胞膜的影响对于阐明细胞对Rb+／Cs+应答的化学规律，以及 今后设计治疗相关疾病的药物都具有一定的意义。 论文选用游离的Rb+／Cs+平lJ人红细胞体外相互作用为对象展开研究。首先，用 显微镜观察法和分光光度法对不同实验体系中Rb+／Cs+引起的人红细胞溶血现象进 行检测，评估其毒理效应。倒置显微镜放大320倍下观察发现：37℃，介质pH=7．4 的条件下，红细胞与Rb+／Cs+温育1．5小时后，红细胞形貌基本不变，直径略有减 小，当Rb+／Cs+浓度增大至90mmol·L。时，少数红细胞出现边缘皱缩现象，但未发 现有细胞破裂的溶血过程。可见光分光光度法的实验结果足：介质中是否存在Rb+， Cs+对细胞相对溶血率没有明显的影响，不同Rb+／Cs+浓度、不同温育温度和温育 时间引起的红细胞相对溶血率均非常微弱。两种方法得出相同的结论：铷、铯对 人红细胞的毒性微弱。 随后分别研究了人红细胞摄取Rb+／Cs+的过程和机理。以游离的cs+为重点研 究对象，原子吸收光谱法为检测手段，系统讨论了胞外Cs+浓度在3×10。4mol·L。1 pH值(6．2．9-2)对人红细胞摄取Cs+过程的影响。在此基础上，选用不同离子通道 或离子载体的特异性抑制剂进一步探讨Cs+的跨膜途径和机理。具体方法是：(1)O．1 mmol·L。1 碱缓冲液中，用加入0．1 ouabain的样品与空白样对照分析Na+／Cs+一反向 协同及“漏入”机制的作用：(3)5％C02气体保护下，10mmol·L～NaHC03辅助50 DIDS(4,4-2二异硫氰酸根一2，2’一二苯乙烯二磺酸钠)检测阴离子通道作用； Bmol·L。1 0．1 (41 行了类似的研究，并初步讨论其相关动力学。 结果显示：在考察范围内，各种影响因素对人红细胞摄取Rb+／Cs+的过程均有 一定的促进作用。细胞摄取Rb+／Cs+随温度和时问的增长而线性增加且对介质pH 值敏感。在温育的前2小时内，Rb+跨膜符合一级动力学，其跨膜转运速率常数 k=-5．025×10‘2h～；随后的过程与Cs+相同，呈现出动力学饱和性。Rb+／Cs+的跨膜方 式相似，本实验得出的结论为：铷铯主要通过Na+／K+．泵的主动运输方式跨膜；Ca2+ 通道对Rb+／Cs+没有通透作用；少量的cs+能“漏入”细胞，微量的Cs+可以模拟 Na十心+一反向协同运输的方式跨膜；在允许HC03存在的pH环境下，-d,部分Cs+ 以CI-／CsC03-交换的形式通过膜上带3蛋白进入人红细胞，这种跨膜方式得到介质 酸碱度影响实验的验证：pH7．4时阴离子通道处于钝化状态，细胞摄入Rb+／Cs+ 较少，pH7．4时通道被激活，细胞摄入Rb+／Cs+量大幅度增长。 原子吸收法检测到细胞膜上结合的Rb+／Cs+量不及进入细胞内离子含量的1％， 可忽略不计，这说明Rb+／Cs+在体内稳定，不与膜上的大分子作用。激光拉曼光谱 对人红细胞膜结构的分析也证明：6mmol·L“和90mmol·Lo的Rb+／Cs+与细胞温育 后，红细胞膜结构并没有明显改变。 关键词：铷铯人红细胞毒性影响因素摄取 膜运输 跨膜方式和机理 and The MembraneofRarealkalimetalions Uptake Transport Human (Rb+／Cs+)inErythrocyte JingLu Abstract：Rarealkalimetalrubidiumandcesiumoccursinhumanattrace