3款荧光定量PCR仪检测甲型HINl流感结果比较.pdfVIP

lJl8 · 现代预防医学2011年第 38卷第6期 Mod ernPreventiveMedicine，2011，Vo1．38，NO．6 则为阴性 。为便于分析 ，仪对 甲型流感通用基因A的检测结 响，样品中病毒 的含量并不均一 ，在病毒量较少，Ct值在 I晦 果进行分析 ，其 中样品二分类 的数据采用卡方分析 ；对样 品 界值附近时 ，尤其对于灰区的样品来说 ．灵敏度对于结果 的影 Ct值的资料进行方差分析及配对t检验。 响非常重要 。仪器 A与仪器 B定性检测 9例样本存在差异 ． 而其 Ct值多数处于灰区。而两款仪器 Ct值的均数存在细微差 2 结果 别，这可能是造成差异的原因：而样本量有限可能是造成未出 256份样 品经核酸检测 ，对仪器 A、B、C所得结果进行 现统计学差异的原因。由于仪器 C测得 Ct值较高 ，其灵敏度 判断，二分类结果采用卡方检验，3款仪器检测结果不完全相 相对低 ，容易造成漏检，给流感的防控带来风险。 同．其 中AB不存在统计学差异，AC、BC差异有统计学 既往资料显示 ，仪器 A使用该试剂能有效排除副流感病 意义 ，其结果见表 1。 毒 、柯萨奇病毒 B和鼻病 毒 以及 季节性流感 (H1N1及 H3N2)、B型流感等 。以美国加利福利亚 (CaliforniaCA)甲 表 1 3款荧光定量PCR仪样品定性检测结果 型H1N1毒株 RNA进行灵敏度实验 ，有效检出限为 l0。6。而 本实验数据结果表明，B仪器为国产仪器 ．与A相 比灵敏度的 差异不大，并且程序运行的时间相近 ，荧光曲线都较为平滑易 于判读。相 比之下，C仪器灵敏度相差约 3个Ct值 。根据 目 前的实验经验 ，将近 8倍浓度差异 ，这对于检测结果有极其明 显的影响。故此后的试验 中，我们推荐使用仪器 A和B，避免 注： A＆Bc： =19．554，P0．001；AB： --0．711，P=0．3990．05 AC： ：10．949，P=0．001；BC： =17．134，P0．001 使用C仪器进行流感病毒 的检测 。而仅用于辅助检测。 目前检测技术的研究多集 中于方法 本身．或是不 同厂 其中189份样品3款荧光PCR仪均可读出Ct值 ，定量结 家试剂 的比较[61，对于仪器 的关注较少。本实验提示 。除技 果进行方差分析 ，显示 3款仪器检测结果不完全相 同，AB 术本身之外，还要考虑仪器等硬件设施的影响，尤其在基层工 组 内无差异；AC、BC组配对t检验结果有差异 ，见表 2。 作 中，要注意结合方法与仪器 ，综合考虑评价检测结果 。保证 其准确性和可信性。 表 2 3款荧光定量 PCR仪样品定量检测结果 ( ±5) (致谢 ：谨向成都市疾控岳勇、杜长慧老师提供的统计方 法 的指导表示感谢。)