利拉鲁肽对高糖条件下SD乳鼠心肌细胞P38MAPK信号通路作用的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 作用的研究 前言………………………………………………………………………8日IJ舌””…”……“………“……………”………………””…………“8 材料与方法………………………………………………………9 结果……………………………………………………………···17 附图………………………………………………………………19 附表………………………………………………………………25 讨论……………………………………………··……·…··…·…27 结论………………···………………………………………···…29 参考文献…………………………………………………………29 综述 GLP．1及其类似物在糖尿病性心脏病变治疗中的意义…………31 致谢···…····………·……………·……………………··………·40 个人简历…………………………………………………………41 中文摘要 的研究 摘要 目的：糖尿病性心肌病(DCM)作为糖尿病独立的心血管并发症日益 受到重视。心肌细胞凋亡在糖尿病心肌病的形成中起到重要作用，最终发 展为充血性心功能衰竭。目前还没有措施能够阻止糖尿病心肌病的形成和 进展。胰高血糖素样肽-1(GLP．1)是由肠道内分泌细胞L细胞分泌的一种 重要的肠促胰岛素，GLP．1类似物一利拉鲁肽作为降糖药物已广泛的应用 于临床，其胰腺外作用特别是对心肌细胞的作用是目前糖尿病领域关注的 热点。本实验旨在探讨GLP一1类似物利拉鲁肽对SD乳鼠心肌细胞在高糖 条件下的作用及其可能的机制。 方法： 1 Dawley)大 SD乳鼠心肌细胞的提取：取1，3天龄的健康SD(Sprague 鼠乳鼠20只，处死后取心尖，应用胰酶及II型胶原酶消化法提取细胞，通 过差速贴壁法纯化心肌细胞，于细胞培养箱中培养48d,时后换液继续培养 24小时，此时可观察到心肌细胞贴壁良好且伪足相互接触交织成网并呈现 同步搏动，通过倒置相差显微镜形态学观察以及荧光法进行鉴定。 2分组干预：将培养72小时的心肌细胞分7组分别为正常糖组 的培养基中继续培养72小时进行以下操作(48小时换液)。 3细胞凋亡检测：将7组细胞干预72小时后酒精固定，用流式细胞 仪检测细胞凋亡率。 blot检测凋亡蛋白caspase。3及P—P38MAPK／P38MAPK。 中文摘要 5数据分析：所得数据采用均数±标准差(x±s)表示，统计分析运 用SPSS 义。 结果： 1一般指标观察：与低糖对照组心肌细胞相比，高糖对照组心肌细胞生长 状态较差，搏动减弱，利拉鲁肽干预组介于正常糖组及高糖组之间，高渗 组及正常糖+高浓度利拉鲁肽组同对照组无明显差别。 VS 差异无统计学意义(PO．05)，高渗组及正常糖+高浓度利拉鲁肽组同正 VS 3．33_+0．32，P0．05)。 3Western blot结果： 表达差异无统计学意义(PO．05)。 拉鲁肽浓度负相关，高浓度利拉鲁肽组P—p38MAPK的表达低于低、中浓 度利拉鲁肽组，但低、中浓度的利拉鲁肽组凋亡率差异无统计学意义 (P0．05)，高渗组及低糖+高浓度利拉鲁肽组同正常糖组比较 P-p38MAPK表达差异无统计学意义(PO．05)。 中文摘要 结论： 1高糖能促进SD乳鼠的心肌细胞凋亡的增加，利拉鲁肽可以对抗心 肌细胞凋亡。 2利拉鲁肽干预组较高糖组的caspase．3表达减少，说明利拉鲁肽能抑 制凋亡蛋白的表达；高糖对照组磷酸化P38MAPK表达较低糖对照增多， 导通道有可能为利拉鲁肽对SD乳鼠心肌细胞发挥保护作用的途径之一。