中药化学3.4香豆素类化学成分的提取分离技术.ppt

3.4 香豆素类化学成分的提取分离技术 1、基本母核：苯骈α-吡喃酮（色原酮的异构体） （邻羟桂皮酸内酯） 一、结构与分类 2、分布 香豆素类在动植物及微生物中均有分布，如致癌成分黄曲霉素类及发光真菌中的亮菌素类均属于香豆素类。这类成分分布得最广的还是高等植物中，其中芸香科和伞形科中分布最多。它们在植物体内以游离状态或与糖结合成苷的形式存在，苷酶解可环合成游离的内酯状态。 一、结构与分类 3、香豆素的结构类型 香豆素母核的苯环或α-吡喃酮环上常有羟基、烷氧基、苯基、异戊烯基等取代，其中异戊烯基的活泼双键又可与邻位酚羟基环合成呋喃或吡喃环结构，根据其取代基及连接方式不同，把香豆素分成几类： （一）简单香豆素类 指只有在苯环上有取代基的香豆素类。如白蜡树枝皮 （二）呋喃香豆素类 香豆素核上的异戊烯基与邻位酚基环合成呋喃环，成环后常伴随着降解失去三个碳原子。 （三）吡喃香豆素类 香豆素的C6或C8异戊烯基与邻酚羟基环合而成2、2-二甲基-α-吡喃环结构。 生理活性 1.毒性：肝毒性 。必要结构：呋喃环上的双键和不饱和内酯环。 2. 抗菌作用：秦皮中的七叶内酯和七叶内酯苷具抑制痢疾杆菌的作用。补骨脂内酯具抗真菌及抗结核活性。 3.平滑肌松弛作用：血管扩张作用。 伞形科凯刺：冠状动脉扩张； 茵陈蒿滨蒿内酯：解痉利胆； 4.抗凝血作用和止血作用： 双香豆素：防血栓及消血块； 泽兰内酯：止血。 5.光敏作用 补骨脂内酯治疗白癜风。 呋喃香豆素多有该作用。很多香豆素可以吸收紫外光，放出在可见区（近470nm）的荧光，故可用做增白剂，如7-OH香豆素。由于吸光性，七叶内酯和七叶苷可用于保护皮肤防止辐射的药物。 二、理化性质 （一）性状 游离苷元：无色至淡黄色结晶，具有芳香性和挥发性； 苷类：粉末状，多数无香味和挥发性。 （二）溶解性 游离苷元：溶于沸水，但不溶于冷水。溶于氯仿、乙醚、醋酸乙酯、丙酮、甲/乙醇等有机溶剂。 苷：易溶于甲/乙醇，可溶于水，难溶于乙醚、氯仿、醋酸乙酯等有机溶剂。 （三）内酯性质和碱水解反应 1、香豆素的α-吡喃酮环具有α，β-不饱和内酯性质，在稀碱液中会逐渐水解生成顺邻羟桂皮酸的盐，而顺邻羟桂皮酸不易游离存在，其盐的水溶液经酸化即闭环恢复成内酯。这个闭合过程极易发生，即使在很弱的酸溶液中，如通入CO2也能促使其内酯化而闭环。 2、香豆素如果和碱液长时间加热，水解产物顺邻羟桂皮酸衍生物则发生异构化，转变成反邻羟桂皮酸的盐，再经酸化也不再发生内酯化闭环反应。 香豆素内酯环发生碱水解的速度主要与C7位取代基的性质有关。 （四）荧光性 香豆素母体本身即无取代的香豆素并无荧光。羟基香豆素类化合物在紫外光下大多显蓝色或蓝绿色荧光，在碱液中更加显著，尤其是C7羟基香豆素，甚至在日光下也可辨认。若在C8或C6再引入羟基，则荧光减弱。引入甲氧基后荧光也将减弱，颜色转变为紫色。 三、检识方法 香豆素类分子中均具有内酯结构，通常还具有酚羟基或内酯水解后产生的酚羟基，通过这些基团的显色反应，能为检识与鉴别香豆素成分提供参考。 （2）若酚羟基邻、对产生的酚羟基对位无取代基，或水解后基，可与一些试剂缩合显色。 3、色谱检识 1、TLC 常用的吸附剂是硅胶，其次是纤维素和氧化铝； 一般采用中等极性的混合溶剂或偏酸性的混合溶剂。 显色方法：首选观察荧光，或用氨熏，喷10%氢氧化钠后再观察。 3.4.2 香豆素的提取与分离 一、提取 1、水蒸气蒸馏法 2、碱溶酸沉法 3、溶剂提取法 二、分离 1、酸碱分离法 2、色谱法 溶剂提取法 1、定义 按极性由小到大的顺序选用不同极性的溶剂组成溶剂系统，依次提取分离提取液中各种不同成分，使各溶解度有差异的成分得到分离。 中药化学成分及其较适用范围的提取溶剂 2、水蒸气蒸馏法 某些小分子的香豆素类具挥发性可用蒸馏法与不挥发性成分分离，常用于纯化过程。 3、碱溶酸沉法 此系经典方法。 1.具酚羟基的香豆素类溶于碱液加酸后可析出。 2.香豆素的内酯环性质，于碱液中皂化成盐而加酸后恢复成内酯析出。 两相溶剂萃取法 1、原理 ：利用混合物