RNAi抑制NEK293细胞TGFβ1表达的研究.pdfVIP

维普资讯 MilMe 0 dUniv)208,29(12) http：／／journal,fmmu．edu．cn 四军医大学学报 (JFourI—h — — — · 研究原著 · 文章编号：1000-2790(2008)12_1125-03 RNAi抑制 NEK293细胞 TGF- 表达的研究 崔飞伦 ，邱 镇 ，陆洪兵 ，姚 震 ，林大春 (江苏大学附属人民医院泌尿外科，江苏 镇放军第359医院泌尿外科，江苏镇江 212000) Inhibitory effectofsiRNA on expres- 作用 (P0．05)，实验组细胞生长受到抑制、凋亡增加 (PO．05)．结论：应用RNAi技术可明显抑制 TGF—p 的表 sion oftransforming growth factor- 达，并高效的抑制NEK293的生长、诱导其凋亡． inNEK293cells 【关键词】转化生长因子p；肾纤维化；RNA干扰 CU／Fei—Lun ，QIUZhen，LUHong—Bing，YAOZhen ，LIN 【中图号】R692 【文献标识码】A Do—Ch“n DepartmentofUrology，Affiliated People’sHospital，Jiangsu O 引言 University，Zhe@ang212002，China，。DepartmentofUroloyg， 肾纤维化是肾脏多种损伤，如创伤、缺血、肾移植 359thHospitalofPLA，Zhe~iang212000，China 术后慢性排异反应及尿路梗阻等修复的共 同转归． 长期以来，肾纤维化被描述为不可逆的静止性瘢痕组 A【bstract】AIM：Toexploretheeffectsoftransforminggrowth 织，但近年来的研究认为纤维化实际上是一个动态过 factor(TGF)一p1一specificsiRNAsonTGF—plexpression，cellcir— cleandapoptosisofNEK293cells．METHODS：ThreeTGF—p】一 程 ，其特征为细胞外基质(ECM)迅速重建和长期的 specificsiRNAswereselectedwiththesuppressingeffect．RNAi 成纤维细胞激活_1]，已知的主要效应细胞为成纤维 expressionvectorswereconstructed andtransfectedintoNEK293 细胞、肾间质细胞等．体外研究-z表明，转化生长因 cells．RT—PCR andW esternBlotwereusedtodetecttheexpres— 子．13。(TGF一31．)是肾间质细胞的主要调控因子．本研 sionofTGF—p1．Theproliferationofthecellswasmeasuredby 究应用 TGF一31．特异性小干扰 RNA(siRNA)，以质粒 MTFtest．Th eapoptosisofNEH293cellswasmeasured byflow 载体转染大鼠肾间质细胞NEK293，观察特异性 siR— cytometry．A nonsensesmallRNA wassetasnegative contro1．