HPLC法同时测定姜及其不同炮制品中5种姜辣素的含量.pdfVIP

关键词姜；反相高效液相色谱法；姜辣素：含量测定 姜【Zingiber 调料，也是常用中药生姜的来源，而其十燥的根状茎是常用干姜的来源Il】。生姜在不l_J炮 制加工条件下制成干姜、炮姜和姜炭，收载于2010年版中罔药典一部中。生姜经炮制后， 其成分发生不同程度变化，可导致药性及功能主治的改变，生姜辛温，主散，擅长解表散 寒，和中止呕：经晒干即得十姜，其性味阜I吣大热，主守，长于温中回阳：干姜经炒黄后 得炮姜，其辛辣刺激性降低，温性增强，长十温中散寒；干姜经炒炭后得姜炭，不具自．辛 味，长于止血i2I。 生姜中主要含有的化学成分是姜盼，主要包括6．姜酚，8一姜盼，10．姜盼，12．姜酚等 10余种，其中6．姜盼含量最高，约占75％131。姜烯盼在牛姜中含量较少，丰要存在十千姜 中，包括6．，8．，10．姜烯酚。姜酮则在炮姜、姜炭中才出现，且含最较低，但现代药理研究 表明，它具有显著的抗氧化、改善脂质代谢、抗病原微乍物、镇静、镇痛、解热等作用， 在保护心血管系统和预防肝损伤方面有良好的应用前景。王维雕等人利用HPLC特征图谱 分析了姜在炮制过程中的化学成分变化，并揭示了姜的炮制原理，指认了6．姜酚、6．姜烯 盼、姜酮3个色谱峰【41，但未对其丰要成分进行定量分析。对于姜及其炮制品中丰要化学 成分的含量测定方法已经有较多报道，主要有气质联用(GS．MS)测定挥发油成分；高效 定或鉴定姜中的化学成分l争引．但至今为止，未见用高效液相色谱法同时测定姜及其炮制品 中的6．，8．，10．姜盼，6．姜烯盼，姜酮5种化合物的含量。为此，本文采用高效液相色谱 法同时测定了姜及炮制品_T．姜、炮姜、姜炭中6．，8．，10．姜酚，6．姜烯酚，姜酮这5种姜 辣素类化合物的含量，并从化学成分分析角度阐述了姜在炮制过程中化学成分的量的变化， 同时为姜及其炮制品的质量标准提供评价方法。 l仪器与试药 l 100型高效液相色谱仪，HPl ChemStation Agilent 100型二极管阵列榆测器。Agilent 型超声波清洗器(昆IIlliJ超·声仪器有限公司)。 生姜药材购自南京市农贸市场，经南京中医药大学刘训乡I=教授答定为姜科姜属植物姜 ginger的新鲜根茎，按《中国药典》2010版的方法，制备干姜、炮姜、姜炭；姜酮(批弓 究中心。甲醇和乙腈均为色谱纯，水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。 2方法与结果 2．1色谱条件及系统适用性试验色谱柱：Kromasil C18柱(250×4．6咖，5“m)；流动相： 柱温30C．进样量为lOttl。在上述色谱条件下，各相邻色谱峰之间的分离度均大于1．5，理 论塔板数均大于4000，满足定量要求。见图l。 176 6。Ginglrol 8一Gingerol Ziagerone ＼． 1 ^ ． 刖 t／mia ’C f Z 叠 冀 H 圮 t／min 图I 混合对照品溶液和供试品溶液的高效液相色谱图 A．混合对照品溶液；B一炮姜供试品溶液 2．2对照品溶液的制备分别取姜酮，6．姜盼，8．姜盼，6．姜烯盼，10．姜盼0．5mg，5mg，lmg， lmg，1．5mg置于25ml容最瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀，即得每1ml含姜酮、6．姜酚、 品溶液。 2．3供试品溶液的制备分别取生姜碎末59，干姜、炮姜、姜炭中粉0．59，精密称定，置 冷，再称定莺量，用甲醇补足减失的蕈量，摇匀，过滤，取续滤液，以0．459m微孔滤膜 过滤，取续滤液作为供试品溶液。 2．4线性关系的考察精密吸取混合对照品溶液适量分别稀释0、2、4、8、16、32倍，精 密吸取上述6种浓度的对照品溶液各IOI_tl，注入高效液相色潜仪，测定姜酮，6．姜盼，8． 姜酚，6．姜烯酚，lO．