高效液相常见问题.docVIP

摘自《丁香园》 请问：我的柱压为什么一直很高？每天做完后我用于5%的甲醇0.2ml/min冲过夜，第二天用甲醇冲30min后再进行工作。 柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，我建议你可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，(此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入)。这时，如果柱压仍不下降，再检查；4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与柱子厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。我看到你用5%的甲醇0.2ml/min冲过夜，虽然流速很低，但你的水相占比例大，对柱子的寿命不好，不知道你的是长柱还是短柱，柱压有多高？请告知！做HPLC时，基线漂移的厉害是怎么回事？做HPLC时，不进样，走梯度，0-20min,20%CH3OH-100%CH3OH, 20-30min,100%CH3OH,用H20/CH3OH,或0.1%TFA/CH3OH,0.1%TFA体系，波长240nm,基线漂移的厉害，大概漂移有2