gp64基因相应dsrna对家蚕核型多角体病毒bmnpv增殖的抑制.pdfVIP

中国农业科学 2007,40(12):2882-2887 Scientia Agricultura Sinica gp64基因相应dsRNA对家蚕核型多角体 病毒（BmNPV）增殖的抑制 1,2 1,2 3 1,2 1,2 夏定国 ，张国政 ，王文兵 ，赵巧玲 ，唐顺明 1 2 （中国农业科学院蚕业研究所/农业部家蚕生物技术重点开放实验室，镇江 212018 ； 江苏科技大学，镇江 212018 ； 3 江苏大学生命科学研究院，镇江 212013 ） 摘要：【目的】研究gp64 基因相对应的多个 dsRNA 对家蚕核型多角体病毒增殖的抑制效果。【方法】体外合 成dsRNA，通过病毒滴度试验、实时定量RT-PCR法研究 gp64 基因的不同区域、不同长度与RNAi干扰效果的关系。 【结果】供试的 6 个 dsRNA 的最大抑制效果相当（滴度 TCID50 的最大抑制差值为 4.00 左右）；经 RNAi 的不同时 间点的gp64 mRNA 表达水平均明显下调(P0.01)，其中48 h的 gp64 mRNA 的表达量约为对照的1/300。【结论】6 个dsRNA均能有效地抑制病毒的基因表达和增殖；gp64 ORF第1 390～1 499位点（G3-3）是RNAi的较佳靶位点。 关键词：双链RNA；家蚕核型多角体病毒；gp64基因；病毒滴度；实时定量RT-PCR Inhibitory Effects of the Corresponding dsRNA of gp64 Gene on BmNPV Multiplication 1,2 1,2 3 1,2 1,2 XIA Ding-guo , ZHANG Guo-zheng , WANG Wen-bing , ZHAO Qiao-ling , TANG Shun-ming 1 ( The Sericultural Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory of Silkworm Biotechnology, Ministry of Agriculture, Zhenjiang 212018 ; 2Jiangsu University of Science and Technology, Zhenjiang 212018 ; 3Institute of Life Science, Jiangsu University, Zhenjiang 212013) Abstract: 【Objective 】Studies were performed to investigate the inhibitory effects of different corresponding dsRNAs of gene gp64 on the multiplication of Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus (BmNPV). 【Method 】 DsRNA were synthesized in vitro .Using the methods of measuring virus