Potyvirus属成员基因组全序列的简并引物PCR和RACE扩增方法.pdfVIP

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2015-08-26 发布于重庆
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Potyvirus属成员基因组全序列的简并引物PCR和RACE扩增方法.pdf

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Potyvirus属成员基因组全序列的简并引物PCR和RACE扩增方法.pdf

第卷第期病毒学报 18 4 VoI . 18 No . 4 2 0 0 2 年 1 2 月 CHI NESE JOURNAL OF VIROLOGY Dec . 2 0 0 2 PotyVirus 属成员基因组全序列的简并引物PCR 和RACE 扩增方法陈炯，陈剑平（浙江省农业科学院病毒室，浙江杭州 31002 1）关键词：马铃薯病毒属；简并引物；全序列测定 Y 中图分类号：文献标识码：文章编号：（） S432 .4 1 A 1000 - 872 1 2002 04 - 037 1 - 04 马铃薯病毒属（enus Pot virus ）是已确定的息学原理，分析登录的植物病毒核苷酸序列来设计 Y g y 植物病毒属中最大的一类，有约 200 个种类被简并引物，扩增未知序列的方法已有不少报道，但研［，］究多限于病毒基因组 1 2 ICT V 接受为确定成员或可能成员，占已发现的植 3 - 末端区域序列。本文物病毒总数的20 % ，且新成员数量仍在不断增加，通过分析设计Potyvirus 属简并引物，初步建立了该是种类最多、寄主范围最广、经济意义最大的病毒属未知成员基因组全序列的PCR 和 RACE 技术快属。该属成员单链正性 RNA 基因组长度一般在速扩增方法。个核苷酸左右，末端具有（）尾，含对已知全序列的属成员编码的多聚 10 000 3 - poIy A Potyvirus 单一的大开放读码框，先翻译成多聚蛋白，随后自催蛋白氨基酸序列作多重序列分析后，根据保守氨基化裂解为10 个成熟产物。该属成员基因组全序列酸序列，设计并筛选出5 个属特异性PCR 简并引物的克隆方法通常采用双链克隆，但由于基因（表）。 cDNA