RNAi研究CK18在肝癌增殖中的作用及不同中医治法的调节_胡卫.pdfVIP

# 7 8# 辽宁中医杂志 2010年第 37 卷第 期 RNA i CK 18 1 1 1 1 1 1 2 , , , , , , ( 11 上海中医药大学基础医学院, 上海 201203; 21 美国科罗拉多大学医学院, 美国 80262) : 目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌 CK18表达的调控差异, 以及 CK 18在人肝癌细胞增殖 中的作用 法: ( 1)采用 DEN诱发大鼠肝癌, 分别经中药健脾益气清热解毒活血化瘀等治疗后, 检测肝癌组织 CK 18表达的差异; ( 2)设计 2 个人 CK18基因 s iRNA 靶点, 将重组质粒电转入 SMMC - 7721人肝癌细胞株, MTT 法检测细胞生长增殖情况 Realtmi e- PCR检测该基因的表达差异结果: ( 1) 芯片结果显示, CK18基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加, 不同中医 治法对其具有不同程度的轻度调控作用, 其中健脾益气治法下调作用较明显; ( 2) 采用 MTT 法筛选到一 个CK 18基因 RNA 干扰有效靶序列, 转染 1 h 后细胞的生长增殖得到了明显的抑制; ( 3)实时荧光定量 PCR 检测表明, 转染 72h 后该 基因的表达已明显降低结论: 肝癌细胞恶性增殖有赖于 CK18基因的高表达, 目前常用治法对该基因的调控作用有 限, 因而该基因可望作为肝癌疗效筛选评价指标 : 肝癌; CK18; 基因芯片; RNA 干扰; 治法 : R2- 03 : A : 1000- 1719( 2010) 0 - 07 8- 0 RNA Interference Studying theRole ofCK18 Gene inProliferation of HepatocarcinomaCellsandAdjustmentofSeveralTC TherapeuticalPrinciples 1 1 1 1 1 1 2 H U Wei , FANG Zhao-qin , LIAN G Chao , GUAN D ong-yuan , DA I X iao-p ing , W U Zhong-hua , GAO B i-f eng ( 11Basi M ed i al S hool, Shanghai University of Trad itional ChineseM edi ine, Shangha i 201203, Ch ina; 21M ed i ial College of C oloroda S tate Un iversity, D enver, 80262Am eri an) Abstract:Obj e tive: To study the different effects of several comm on TCM form ula therapies on the expression of CK 18 gene in rat liver cancer and its role in grow th and proliferation of humane hepatocarcinom a cells.M ethod s: 1) Rat hepatocellu lar carcino- m a(H CC) m odelswere induced by diethylnitrosam ine( DEN ), the ratsw ere treated by d ifferent therap