微生物菌种对大庆原油的降解作用.pdfVIP

维普资讯 大 庆 石 油 学 院 学 报 第28卷 第6期 2004年 12月 JOURNAlOFDAQINGPETROlEUM INSTITUTE Vo1．28 No．6 Dec． 2004 微生物菌种对大庆原油的降解作用 伍晓林 ，侯兆伟 ，陈 坚 ，伦世仪 (1．江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214036； 2．大庆油 lit有限责任公司 勘探开发研究院，黑龙江 大庆 163712) 摘 要 ：通过实验研究了微生物菌种对大庆原油的生物降解规律．结果表明：蜡状芽孢杆菌和短短芽孢杆菌只对原 油中高碳链的饱和烷烃具有生物降解作用 ；HP降解偶数高碳链饱 和烷烃的能力强于降解奇数高碳链饱和烷烃；HT对 偶数和奇数高碳链饱和烷烃具有较强的降解能力 ；HP和 HT对原油芳烃中菲系列发生生物降解作用，引起原油的MPI 和DPI指数提高，说明菲系列中化学性质较为活跃的组分易被实验菌种降解． 关 键 词 ：微生物降解；蜡状芽孢杆菌 ；短短芽孢杆菌；饱和烃；芳香烃；非烃；氧化途径 中图分类号 ：TE357．46 文献标识码：A 文章编号：1000—1891(2004)l06一O014—03 石油是烃类混合物，可分为饱和烃、芳香烃、非烃．自然界中能降解石油烃的微生物广泛存在于土壤、 地下水、海洋 、湖泊等环境中．微生物对不同种类烃的降解能力不同，石油烃中正构烷烃最易降解 ，经微生 物氧化后生成有机酸 ．氧化途径有单末端氧化、双末端氧化和次末端氧化．笔者拟研究微生物菌种对 大庆原油的降解规律，为微生物采油机理研究提供参考． 1 实验材料及方法 1．1 菌种与培养基 从大庆油田产出污水中筛选的混合菌 U一、蜡状芽孢杆菌 HP(Bacilluscereus)、短短芽孢杆菌 HT (Brevibacillusbrevis)为菌种 ；大庆油田有限责任公司第一采油厂产 出污水，氯化钠 ，磷酸氢二钠 ，磷酸二 氢钾 ，硫酸镁 ，氯化氨，酵母浸粉及微量元素为培养基，pH值为 7．0～7．2，温度为 45℃． 1．2 原油组分 (1)族组分分析．将 已知量的待分析原油用过量的石油醚浸泡 12h，过滤不溶的胶质和沥青并定量； 然后用硅胶一氧化铝混合层析柱 ，分别用正已烷 、正已烷和二氯甲烷混合物 (1：1)、乙醇和三氯甲烷混合 物 (1：1)淋洗，并分离得到原油中的饱和烃 、芳烃和非烃 ，再分别定量．平行做 3个样，取平均值． (2)饱和烃分析．采用毛细管气相色谱法分析饱和烃．仪器 ：HP一6890色谱仪 ；色谱柱 ：HP一1 MethylSiloxane25rn石英毛细管；气化室温度 ：280℃；程序升温：50℃恒温 1min，以升温速率为 5℃／ min升温到 300℃，然后再恒温 20min． (3)芳烃分析．采用 GC—MS法分析原油中芳烃．仪器 ：GCTSQ7000气一质联用仪；色谱柱 ：HP一2 60In石英毛细管；气化室温度：280℃；程序升温 ：50℃恒温 1min，以升温速率为 6℃／min升温到 300 ℃，然后再恒温20min． (4)非烃分析．采用显微一红外法 (仪器型号：NEXUS670FT—IR，美国NICOLET公司生产)定性分 析非烃中包含的有机官能团瞳]，用非水酸碱滴定法定量测定原油中有机酸的质量分数． 1．3 实验过程 将污水配制的培养液分装在三角瓶中，灭菌．分别接入活化的HP，HT，U一菌种 ，并保 留一空 白样 ， 加入质量分数为2 原油，放入摇床 ，在温度为45℃条件下发酵 10d，摇床转速为 120r／min．发酵后 ，将 收稿 日期 ：2004—08—02；审稿人：贾振歧；编辑：王文礼 作者简介：伍晓林 (1964--)，男，博士生 ，高级工程师，主要从事微生物采油方面的研究 · 】 · 维普资讯 第 6期 伍晓林等：微生物菌种对大庆原油的降解作用 发酵液在 3000r／min条件下冷冻，离心2O