VEGFR1基因特异性siRNA的筛选.pdfVIP

, Jou nal of Anhui Ag i. Sci. 2008, 36( 18) : 7862- 7864, 7888 张杨林 傅真治 人类和动物血管生成与肿瘤生长侵袭转移密切相关, 血管内皮生长因子能特异性与血管内皮生长因子受体 合, 促进内皮细胞的分裂增殖及迁移, 在肿瘤新生血管生成过程中起着至关重要的作用抗血管生成疗法已有效应用于肿 瘤治疗该文对VEGFR1基因特异性siRNA 进行了筛选, 探讨了RNA 干扰VEGFR1作为基因治疗的可行性, 可为农业生物医 药研究者进行相关研究提供参考 VEGFR1 siRNA 1, 2, 3 2 李艳 , 张必良 ( 1. , 510650; 2. , 510663; 3. , 100080) [ 目的] 筛选血管内皮生长因子受体( VEGRF) 基因特异性小干扰RNA( Small Inte fe ence RNA, siRNA) , 为肿瘤等疾病的基因治疗寻 找一种新途径[ 方法] 以高表达VEGFR 1的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC) 为模型, 采用RNA 干扰技术, 化学合成了3 条针对血管内 皮生长因子受体 1( VEGFR1) 的特异性siRNA, 用Lipofectamine2000TM 转染HUVEC 细胞株, 通过Real time RT-PCR 技术检测HUVEC 细胞 VEGFR 1基因mRNA 的表达并对效果最好的VEGFR1 siRNA- 2 进行siRNA 的浓度梯度效果检测[ 果] 果表明, 与对照组相比, 所 设计的3 条siRNA 均能不同程度地抑制VEGFR1 mRNA 的表达, 其中siRNA 2 号最有效, 浓度为50 nmol/ L 时抑制率达到95% 左右在浓 - 度梯度试验中,VEGFR1 siRNA 2 转染浓度为50 pmol/ L 时, 对VEGFR1 基因的沉默效果还能达到50% 左右[ 论] 所设计的siRNA 能有 - 效抑制VEGFR1 基因的表达, 为RNAi 用于靶向VEGFR1 的基因治疗提供了非常有效的siRNA 序列 RNA 干扰; siRNA; 人脐静脉血管内皮细胞; 血管内皮生长因子受体; 基因治疗 R734. 2 A 0517- 6611( 2008) 18- 07862- 03 Screening of VEGFR1 specific siRNA for therapeutic application LI Yan et al ( South China Botanical Ga den, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou, Guangdong 510650) Abstract [ Objective] The small inte fe ence RNAs ( siRNAs) of vascula endothelial g owth facto ecepto 1(VEGFR1) was selected fo a the new ap- p oach of tumo and othe diseases-cu ing. [Method] In this study, we have applied RNA inte fe ence (RNAi) technology by utilized chemically synthesized small inte fe ence RNAs ( siRNAs) to block the gene exp ession of vascula endothelial g owth facto ecepto 1(VEGFR1) in human umbilical vein en- dothelial cells (HUVEC) . The initial expe iments we e ca ied out with 5